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在RNAi研究中,测定敲除效率时,通过转染控制的zei适化,可以获得高敲除效果。因此,为了将RNAi研究成功导入,需要对客户希望的细胞进行转染效率的zei适化工作。
(1)服务流程 1)对需要用于转染的细胞进行细胞培养; 2)优化转染条件:在荧光显微镜下检测Fluorescent Oligo或可表达GFP的干扰载体的荧光强度,评估转染效率 3)为靶基因设计一组siRNA双链或干扰载体 4)采用荧光定量RT-PCR或免疫蛋白印迹评估转染后某一时间点靶基因的RNA水平或蛋白水平的变化 5)可利用抗生素来筛选稳定表达shRNA或miRNA的细胞株
(2)您需要提供: 1)选择的细胞系和详细的细胞培养的操作步骤 2)选择的靶基因cDNA的序列号 3)抗体(如果需要Western blot检测)
(3)我们提供: 1)转染效率分析 2)Knockdown分析,包括荧光定量PCR检测报告、Western Blot图片等
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