Bradford蛋白浓度测定试剂盒 C0185

• C0001 蛋白酶抑制剂 Cocktail (EDTA-Free, 100× in DMSO)

• C0004 磷酸酶抑制剂 Cocktail III (2 Tubes, 100x)

• C0045 RIPA裂解液(强)

• C0190 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (5×)

• C0187 考马斯亮蓝快速染色试剂盒

• C2003 特超敏 ECL 化学发光底物

500 T规格的产品组成如下：

• 灵敏度高：最低可检测蛋白量达0.625 μg，适用于低浓度样品的快速检测。
• 线性范围广：在0.125–1.5 mg/mL范围内具有良好的线性关系，适用于大多数蛋白样品。
• 检测快速：一步加样反应，整个检测过程可在10 min内完成，大大提高实验效率，适合快速筛选与高通量实验。
• 兼容性强：Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，尤其是还原剂，可以兼容样品中高达1 M的β-Mercaptoethanol，5 mM的DTT。但本试剂盒受略高浓度的去垢剂的影响，需确保SDS低于0.01%，Tween 20、60、80低于0.015%，Triton X-100低于0.05%。

Bradford蛋白浓度测定试剂盒适用于细胞裂解液、组织提取液及纯化蛋白样品的快速定量分析。

1. 蛋白标准品的准备
1）向一管5 mg的BSA蛋白标准品中加入1 mL蛋白稀释液，充分溶解后配制成5 mg/mL的蛋白标准品溶液。配制后可长期储存于-20°C，建议分装储存避免反复冻融。
注：待测蛋白样品在什么溶液中，蛋白稀释液也宜为相同溶液。也可以用0.9% NaCl或PBS作蛋白稀释液。
2）将5 mg/mL的蛋白标准品溶液，按下表所示配制为浓度梯度稀释的蛋白标准品溶液，浓度分别为0、0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5 mg/mL。

2. 蛋白浓度测定
1）各取5 μL浓度梯度稀释的蛋白标准品溶液到96孔板的标准品孔中。
2）取5 μL待测样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足5 μL，需加蛋白稀释液补足到5 μL。
3）各孔加入250 μL Bradford Protein Staining Solution。
4）在2 h内，用酶标仪测定595 nm波长的吸光度。
5）根据BSA标准品的吸光度，绘制标准曲线（X-蛋白浓度mg/mL；Y-A595）。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度。

4℃保存，一年有效。
蛋白标准品（BSA）配成溶液后可置于-20℃保存一年。

1. 使用前建议将Bradford Protein Staining Solution平衡至室温，提高检测灵敏度。
2. Bovine Serum Albumin Standard使用前应充分混合均匀。
3. 本品仅适用于专业科研用途，严禁用于临床诊断、治疗、食品或药品领域，且不得存放于住宅等非专业场所。
4. 为保障操作安全与人员健康，操作时请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。

• C0185-Bradford蛋白浓度测定试剂盒说明书-中文(1.28 MB)