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线粒体能量代谢技术服务 一、细胞耗氧量的检测(Seahorse XF Cell Mito stress test) 在加oligo之前显示的数值,代表的是细胞的基础耗氧量,包括线粒体氧化***酸化及质子漏耗氧。即质子在线粒体膜通过呼吸链形成电势能后,一部分质子回流可以通过ATP合酶形成ATP,将势能转化为ATP中的能量。一部分通过线粒体膜但是只是发生氧化,势能转化为热量,但是没有用于合成ATP。oligo是ATP合酶抑制剂,加入此药后减少的耗氧代表的是机体用于ATP合成的耗氧量,间接显示此时细胞的ATP产量。FCCP是一种解偶联剂,作为一种质子载体使得大量质子回流,大量耗氧,但是这种质子回流不能形成ATP,FCCP后耗氧的增加,代表线粒体的zei大耗氧能力,间接显示zei大的呼吸能力,而其相对与基础值的高值代表其还具有的呼吸潜力。zei后加入是抗霉素A和寡霉素,二者是呼吸链抑制剂,完全阻止线粒体耗氧。 二、细胞的胞外产酸能力间接显示糖酵解能力(Seahorse XF Glycolysis Stress Test Kit) 基础值代表的是细胞的非糖酵解产酸值,加入葡糖糖后代表的是此时细胞的糖酵解能力,而加入oligo后,氧化***酸化被抑制,此时细胞完全靠糖酵解供氧,此时产酸增加,增加值代表细胞的还具有的糖酵解能力即潜力,总的数值代表细胞的zei大糖酵解能力,zei后加的是糖酵解抑制剂,此药之后的数值表明完全是由糖酵解之外的机理产酸所致的。
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