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❀实验流程
1. 亚克隆:将客户优化好的目的基因(吉锐生物也可以提供基因优化服务)克隆到吉锐生物定点整合载体上; 2. 转染:采用独家的 CHO-MCI(多拷贝整合)技术,将定点整合载体电转到 CHO-SC 细胞中; 3. 稳转池验证:30ml 摇瓶小试表达目的蛋白并纯化。将细胞培养上清通过合适的,可与重组表达目的蛋白的标签结合的柱填料进行纯化,SDS-PAGE跑胶,同时通过上牛血清白蛋白(BSA)作为对照带进行定量和纯度分析。 4. 扩大培养:根据 30 ml 的定量结果,估算获得客户要求数量的蛋白所需要扩大培养的体积,拿到足够量的蛋白。
❀实验案例
案例1:
案例2: 利用 MCI 技术将红色荧光蛋白基因定点整合到 CHO-K1 细胞基因组中,配合使用 Genloci® 的独创产品 Cell Plaza™(GP5036)筛选阳性克隆,扩大培养后,在倒置显微镜下和荧光显微镜下观察细胞。
案例3: 利用 MCI 技术将客户的目的基因整合到 CHO 细胞基因组中,配合使用 Genloci® 独创产品 Cell Plaza™(GP5036)筛选阳性克隆,ELISA 结果分析显示,在挑选的 32 个克隆中,共有 16 个克隆的抗体表达量较高,其中 3 个克隆的表达量超过 12.5ng/mL。
案例4:表达pool验证 抗体Y 125mL摇瓶pool上清SDS-PAGE检测见figure 3,CHO-SC上清纯化后可得蛋白 272mg/L,同样条件传统CHO-S上清纯化后可得蛋白 125mg/L。生产周期4-5周,产量达到mg/10mL,满足很多客户要求,省去了很多等待时间。
毫克级抗体快速表达,
毫克级抗体快速表达信息由江苏吉锐生物技术有限公司为您提供,如您想了解更多关于毫克级抗体快速表达报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
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