应用方案 ┃ 饲料中总汞、总磷的测定原子荧光光度法分光光度法

2023-04-06 16:26:02, 管理员美析（中国）仪器有限公司

应用方案 ┃ 饲料中总汞、总磷的测定原子荧光光度法分光光度法

第一部分:饲料中的汞的测定

原理

动物源性食品是食品行业的中的重要组成，在其生产过程中，过量的有毒有害物质，特别是重金属元素通过所饲养的动物排泄到土壤或水域中，对人类的生存环境构成威胁。为维护我国动物源性食品安全，农业农村部下达第194号文件，决定加强饲料商品管理。其中重金属元素汞毒性强，是饲料样品中重要的检测指标。

试样经酸加热消解后。在酸性介质中,试样中汞被硼氢化钾(KBH.)或硼氢化钠(NaBH,)还原成原子态汞,由载气(氩气带人原子化器中，在特制汞空心阴极灯照射下，基态汞原子被激发至高能态,在去活化回到基态时,发射出特征波长的黄光,其荧光强度与汞含量成正比，与标准系列比较定量。

标准依据GB/T 13081- -2022

仪器及试剂

美析AFS-680原子荧光光度计。

汞空心阴极灯；

微波消解炉；

实验室用样品粉碎机或研钵。

硝酸(优级纯)。

30%过氧化氢。

硫酸(优级纯)。

混合酸液硫酸+硝酸+水(1+1+8):量取10 mL硝酸(4:2.1)和10 mL硫酸(4.2.3),缓缓.

倒人80mL水中,冷却后小心混匀。

硝酸溶液:量取50 mL硝酸,缓缓倒入450 mL水中,混匀。

氢氧化钾溶液(5 g/L):称取5.0g氢氧化钾,溶于水中,稀释至1 000 mL,混匀。

硼氢化钾溶液(5 g/L):称取5.0 g硼氢化钾,溶于5.0 g/L的氢氧化钾溶液中,并稀释至1000mL,混匀,现用现配。

汞标准储备溶液:按GB/T602--2002中规定进行配制,或者选用国家标准物质一汞标准溶液(GBW 08617),此溶液每毫升相当于1000ug汞。

汞标准工作溶液:吸取汞标准储备液1 mL于100 mL容量瓶中,用硝酸溶液(4.2.5)稀释至刻度,混匀,此溶液浓度为10 ug/mL.再分别吸取10ug/mL汞标准溶液1 mL和5 mL于两个100 mL容量瓶中，用硝酸溶液(4.2.5)稀释于刻度,混匀,溶液浓度分别为100 ng/mL和500 ng/mL,分别用于测定低浓度试样和高浓度试样,制作标准曲线,现用现配。

分析步骤

微波消解法

称取0.20g~1.0g试样,精确到0.0001 g,置于消解罐中加人2 mL~10 mL硝酸，2mL~4mL过氧化氢,盖好安全阀后,将消解罐放人微波炉消解系统中，根据不同种类的试样设置微波炉消解系统的最佳分析条件(见表1和表2),至消解完全,冷却后用硝酸溶液洗涤消解罐并定容至50 mL容量瓶中(低含量试样可定容至25 mL容量瓶)混匀待测。同时做试剂空白试验。

标准系列配制

低浓度标准系列:分别吸取100 ng/mL汞标准使用液0. 50 mL、1. 00 mL、2. 00 mL、4. 00 mL、5. 00 mL于50 mL容量瓶中,用硝酸溶液稀释至刻度,混匀。各自相当于汞浓度1.0 ng/mL.2.0 ng/mL.4. 0 ng/mL.8. 0 ng/mL.10. 0 ng/mL.此标准系列适用于-般试样测定。

高浓度标准系列:分别吸取500 ng/mL汞标准使用液0. 50 mL、1. 00 mL.2. 00 mL、3. 00 mL.4.00 mL于50 mL容量瓶中,用硝酸溶液稀释至刻度,混匀。各自相当于汞浓度5. 0 ng/ mL、10.0 ng/mL.20. 0 ng/mL.30. 0 ng/ mL.40.0 ng/mL.此标准系列适用于鱼粉及含汞量偏高的试样测定。

仪器参考条件

光电倍增管负高压:260V;汞空心阴极灯电流:30mA;原子化器:温度300C,高度8.0mm;氩气流速:载气500mL/min,屏蔽气1000mL/min;测量方式:标准曲线法;读数方式:峰面积;读数延迟时间:1.0 s;读数时间:10.0 s;硼氢化钾溶液加液时间:8.0 s;标准或样液加液体积:2 mL。仪器稳定后，测标准系列，至标准曲线的相关系数r>0.999后测试样。

浓度测定方式:设定好仪器最佳条件,逐步将炉温升至所需温度后,稳定10 min~20 min后开始测量。连续用硝酸溶液进样,待读数稳定之后,转入标准系列测量,绘制标准曲线。转入试样测量,先用硝酸溶液进样,使读数基本回零,再分别测定试样空白和试样消化液,每测不同的试样前都应清洗进样器。

仪器自动计算结果方式:设定好仪器最佳条件,在试样参数画面输入以下参数:试样质量(g),稀释体积(mL),并选择结果的浓度单位,逐步将炉温升至所需温度,稳定后测量。连续用硝酸溶液进样,待读数稳定之后,转人标准系列测量,绘制标准曲线。在转入试样测定之前,再进人空白值测量状态,用试样空白消化液进样,让仪器取其均值作为扣底的空白值。随后即可依法测定试样。测定完毕后,选择“打印报告”即可将测定结果自动打印。

计算

式中:

ω试样中汞的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); .

C-试样消化液中汞的含量,单位为纳克每毫升(ng/mL);

C0-试剂空白液中汞的含量,单位为纳克每毫升(ng/mL);

V--试样消化液总体积,单位为毫升(mL);

m-试样质量,单位为克(g)。

测定结果以平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数值；

精密度

在重复性条件下，获得的两次独立测量结果与算术平均值的绝对差值与该算术平均值的比值及相对偏差r应符合下表要求；

测定结果/(mg/kg)	相对偏差（r）%
≤0.020	≤100
0.020-0.100	≤50
≥0.100	≤20

第二部分：饲料中总磷的测定分光光度法

1、范围

本标准规定了用钼黄分光光度法测定饲料中总磷量的方法。

本标准适用于饲料原料(除磷酸盐外)及饲料产品中磷的测定。

2、引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

GB/T6437-2002

3、原理

将试样中的有机物破坏，使磷元素游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的 [(NH4)3P04NH4VO3 ·16MoO3〕络合物，在波长400 nm下进行比色测定。

4、试剂

实验室用水应符合 GB/T 6682中三级水的规格，本标准中所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯。

4.1 盐酸溶液:1+1

4.2 硝酸。

4. 3 高氯酸。

4.4 钒钼酸铵显色剂:称取偏钒酸铵 1. 25 g，加水 200 mL加热溶解，冷却后再加入 250 ml硝酸 (4.3)，另称取钼酸铵25 g，加水400 mL加热溶解，在冷却的条件下，将两种溶液混合，用水定容至 1 000 ml，避光保存，若生成沉淀，则不能继续使用。

4.5 磷标准液:将磷酸二氢钾在 105摄氏度干燥 1h，在干操器中冷却后称取0.2195g溶解于水，定量转入1 000 ml容量瓶中，加硝酸 3 mL，用水稀释至刻度，摇匀，即为50 ug/mL的磷标准液

5、仪器和设备

5.1 实验室用样品粉碎机或研钵。

5.2 分样筛:孔径0.42 mm(40目)。

5. 3 分析天平:感量0. 0001 g,

5.4 V-1500型分光光度计:可在 400 nm下测定吸光度。

5. 5 比色皿:1 cm

5.6 高温炉:可控温度在(55。士20)''C.

5.7 瓷坩埚:50 ml,.

5.8 容量瓶:50.100,1000 ml

5.9 移液管:1.0,2. 0,5.0,10.0 ml.

5.10 三角瓶:250 ml。

5.11 凯氏烧瓶:125,250 ml。

5.12 可调温电炉:1000W

6、试样制备

取有代表性试样2 kg，用四分法将试样缩分至250 g，粉碎过0.42 mm孔筛，装入样品瓶中，密封保存备用

7、测定步骤

7.1 试样的分解

7.1.1 干法{不适用于含磷酸氢钙[Ca(H2PO4)2]的饲料} 称取试样 2 g-5 g(精确至。.0002g)于柑涡中，在电炉上小心炭化，再放人高温炉，在 550 C灼烧 3 h(或测粗灰分后继续进行)，取出冷却，加人 10 mL盐酸(4-1)和硝酸(4.2)数滴，小心煮沸约10 min, 冷却后转入 100 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。

7.1.2 湿法

称取试样 0.5 g-5 g(精确至0. 000 2 g)于凯氏烧瓶中，加人硝酸(4.2)30 mL，小心加热煮沸至黄烟逸尽，稍冷，加人高氯酸(4.3)10 m工，继续加热至高氯酸冒白烟(不得蒸干)，溶液基本无色，冷却，加水 30 ml，加热煮沸，冷却后，用水转入 100 mL容量瓶中并稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。

7.1.3 盐酸溶解法(适用于微量元素预混料) 称取试样。.2g^1 g(精确0.0002g)于100 mL烧杯中，缓缓加入盐酸(4. 1)10 mL，使其全部溶解，冷却后转入 100 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。

7.2 工作曲线的绘制准确移取磷标准液(4. 5)0.0,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0 ml于 50 mL容量瓶中，各加钒钼氨酸显色剂(4. 4) 10 ml ，用水稀释到刻度，摇匀，常温下放置 10 min以上，以0.0 mL溶液为参比，用 1 cm比色皿，在 400 nm波长下用分光光度计测各溶液的吸光度。以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制工作曲线

7.3 试样的测定准确移取试样分解液 1. 0 mL-10. 0 mL(含磷量50ug-750 ug)于50 mL容量瓶中，加人钒钥酸钱显色剂(4.4)10 mL，用水稀释到刻度，摇匀，常温下放置 10 min以上，用 1 cm 比色皿在 400 nm波长下测定试样分解液的吸光度，在工作曲线上查得试样分解液的磷含量。

8 测定结果的计算及表述

8.1结果计算

测定结果按式(1)计算：

x一以质量分数表示的磷含量%;

m1 一由工作曲线查得试样分解液磷含量ug;

V- 试样分解液的总体积ML;

m一试样的质量g;

V1 一试样测定时移取试样分解液体积mL

8.2 结果表示

每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均值为测定结果，所得到的结果应表示至小数点后两位

9 允许差

含磷量 0.5%以下.允许相对偏差 10%;含磷量 0.5%以上，允许相对偏差 3%.

第三部分: 核心仪器的参数及特点

AFS-680双道双蠕动泵原子荧光光度计

1仪器用途

1.1 适用于样品中砷、汞、硒、锡、铅、铋、锑、碲、锗、镉、锌、金等十二种元素的痕量分析。

2工作环境

2.1 电源：220V，50Hz
2.2 温度：15～35℃（严格来说是15～25℃）
2.3 相对湿度：≤90%

3技术参数：

3.1 检出限(D.L.):
3.1.1 As、Se、Pb、Bi、Sb、Te、Sn ＜ 0.01µg/L
3.1.2 Hg、Cd ＜0.001µg/L
3.1.3 Ge ＜0.05μg/L
3.1.4 Zn ＜1.0μg/L
3.1.5 Au ＜3.0μg/L
3.2 精密度（RSD）≤0.7％
3.3 线性范围: 大于三个数量级。

4仪器主机：

4.1 进样系统
4.1.1 *双蠕动泵：原子荧光顺序注射蒸气发生双蠕动单控进样装置，可以设置时间、体积、速度的变化，微升级样品采集，长期运行稳定可靠；（提供省级以上权威机构出具的检测报告扫描件，供货时采购方有权核查原件）
4.1.2 *蠕动泵采用十滚轴，4通道,各通道可单独调节，蠕动泵卡具有档位色标提示功能，可快速分辨出蠕动泵工作时所在的档位，避免档位间的混淆，节省操作时间。蠕动泵进样系统具有测样速度快的特点（单个样品测量时间小于20s），缩短检测时间，提高工作效率。适用于浑浊及基体复杂样品的检测。软件可选择进样流程，自动切换。（需提供彩页和实物图进行佐证）
4.1.3 蠕动泵管采用100%进口原装原封，不再经过人工二次加工制作，一根原装泵管的使用寿命高于常规泵管2倍以上。
4.1.4 流路系统：机加全透明流高度集成三维流路系统，降低了流路系统的复杂程度，易于观察液体传输状态，有效抑制记忆效应；
4.1.5 *原子荧光光谱仪的分离富集无残留蒸气发生系统；（提供省级以上权威机构出具的检测报告扫描件，供货时采购方有权核查原件）
4.1.6 存样环：全透明氟聚合物管路，机加一体化成型存样环；可观察样品情况，避免漏液；
4.2 气路系统
4.2.1 双重气液分离装置：一级气液分离器具有快速除泡沫功能，避免反应溶液进入原子化器；载气气路中带有逆止阀，防止反应溶液进入气路；
4.2.2 二级气液分离器：采用新型去除水蒸气的装置，无需加水或手动排水；
4.2.3 可实现全管路清洗，包括一级气液分离器、二级气液分离器及氢化物传输管路，避免反应系统残留和管路结晶。如使用自动进样器时，清洗过程具有排空功能。
4.2.4 气路系统：能实时显示气体流量和流量异常提示及无载气安全保护；测试结束关断气体，进入省气模式，做样时气路自动开启。
4.2.5 采用新型断续流动无残留蒸气发生反应系统，反应效率更高
4.2.6 *具有原子荧光精密检测涌流式气液分离系统，化学反应更完全，气液分离效果更佳，特别适合岩矿、土壤等复杂样品测定；（提供省级以上权威机构出具的检测报告扫描件，供货时采购方有权核查原件）
4.2.7 具有载气稳流装置，既可在线消除硼氢化钾产生的气泡，又可降低试剂间扩散效应，提高仪器稳定性
4.2.8 排废系统：自动生成与再生液封，液封自平衡，自溢流排废，自动抑制泡沫生成。提高了氩氢火焰和原子化区域气流的稳定性。
4.3 光学系统
4.3.1 双道两元素可同时测量。
4.3.2 光路：双光束光学系统，多灯位设计，全通道双光束对等系统设计，具有极佳的通道一致性，抗干扰杂光影响，提高仪器准确性和稳定性。
4.3.3 元素灯放置45°角度斜面设计，减少光源之间干扰，具有低背景高信号的优点，原厂高性能元素灯即插即用。（需提供实物图片进行佐证）
4.3.4 光源系统：空芯阴极灯采用新式脉冲调制/恒流驱动供电方式。
4.3.5 检测系统：采用进口光电倍增管，寿命大于10年以上。
4.3.6 免调灯：直插式免调节空心阴极灯，免工具3秒极速安装，精密微步电机控制和高精度微米级二维PSD光斑探测，空心阴极灯光斑位置的自动调节、对准以及位置锁定。
4.3.7 *具有漂移补偿功能，自动优化元素灯漂移，确保仪器稳定；连续测量4小时砷锑标准溶液，最大漂移量不超2％。可设置每间隔n个样品回测载流空白，与初始载流空白荧光值最大偏差不超10％。汞灯自动激发，在长时间使用后也无需使用辅助工具激发起辉；（提供省级以上权威机构出具的检测报告扫描件，供货时采购方有权核查原件）
4.3.8 采用消除道间干扰技术，在测定过程中，空芯阴极灯由恒流脉冲电源供电，交替点亮，从而激发不同元素的原子荧光信号，达到可多元素同时测量的目的，消除了对下一通道信号的影响，保证每个数据都准确可靠。
4.4 原子化系统
4.5 免维护点火技术：百万次免维护高可靠性智能点火系统。
4.6 采用密闭式石英原子化器，屏蔽式低温点火石英炉原子化器，具有氩氢火焰观察窗，可实时监测火焰状态。
4.7 原子化器控温技术：高精度自适应比例积分微分(PID)控温，控温精度高，速度快，长期稳定可靠。原子化器温度在室温～450℃之间连续可调；温度控制精度：±0.5℃。

5数据处理系统：

5.1 可随意脱机/连机切换工作
5.2 单/多窗口任意打开
5.3 单/多数据库任选
5.4 软件系统自动诊断、自动样品测量、自动清洗、单标准自动配制标准曲线，自动稀释和超限自动标记，测量完成后自动休眠，自动保存数据；
5.5 *软件可设置空白判别值，对空白清洗进行监测，对采样前与清洗后的反应情况进行比较，自动判断流路是否清洗干净。（需提供软件截图进行佐证）
5.6 采用Windows98/2000/XP的中文窗口操作软件，可实现自动系统诊断、自动样品测量、标准曲线法测量，多种报告格式

6功能特点

6.1.1 元素灯组件免调试，即插即用，使用方便；
6.1.2 杜绝交叉污染,节约样品和试剂用量；
6.1.3 高效电子除水装置，减少荧光淬灭，提高检测灵敏度；
6.1.4 泵速、采样时间等均可自行调节，单次测定时间小于30秒。
6.1.5 电路系统：采用强、弱电路分离式设计，高集成度功能板卡式电路结构，有效减少了电路之间的相互干扰，检测速度大大的提高，有效降低仪器的维护费用。
6.1.6 可升级成液相色谱原子荧光联用仪，进行元素价态的分析。且具有液相色谱和原子荧光联用双化学反应系统。

7配置要求

7.1 原子荧光光度计主机：1台；
7.2 高强度空心阴极灯：2只；
7.3 标准溶液 1只
7.4 氢化物屏蔽式原子化器： 1套
7.5 集扩式气体传输室： 1套
7.6 软件工作站：1套
7.7 品牌电脑：1台；
7.8 打印机：1台；

V-1500可见分光光度计

1技术指标及基本参数：

1.1 *光学系统：双光束比例检测系统
1.2 波长范围：320～1100nm
1.3 *光谱带宽： 2nm、4nm可调
1.4 波长准确度：±0.5nm
1.5 波长重现性：≤0.2nm
1.6 *透射比准确度: ±0.2% τ
1.7 *透射比重复性：0.1% τ
1.8 杂散光：≤0.05% τ (220nm NaI，340nm NaNO2)
1.9 稳定性： 0.001A/h（500nm预热后）
1.10测光方式：透过率、吸光度、浓度、能量
1.11波长调节：自动调节
1.12光度范围：-0.3～3A
1.13显示方式： 128*64液晶
1.14检测器：进口硅光二极管
1.15光源：进口钨灯
1.16电源： AC 220V/50Hz 110V/60Hz
1.17功率： 120W
1.18仪器尺寸： 480×350×220mm
1.19主机净重： 11Kg

2仪器特点

2.1 采用单片微机控制，数码显示，宽大的液晶显示器可显示多组数据
2.2 巨大的内存空间，可存储多组数据和曲线
2.3 自动调0、调100%功能
2.4 波长自动调节
2.5 宽大样品池（5mm～100mm）
2.6 具有最多十点标样建标准曲线测量功能
2.7 可通过直接输入K、B因子建立标准曲线进行定量测量、进行浓度直读
2.8 可直接输入标样和对应浓度值进行浓度测量
2.9 可断电保存测量设置的标准曲线参数
2.10配备通用并行打印接口，可打印标题栏、测量数据、曲线参数、曲线标准样品点和曲线
2.11*带RS232串行接口和USB串口。可选配串行打印机直接打印测试数据
2.12*无需光门
2.13*滤光片内置设计
2.14滤色片自动切换
2.15*先进的稳压电源匹配技术，机器在操作过程中灯源电压始终保持在稳定状态，延长了灯源寿命的同时，更增加了测试的准确性。（提供证明材料）
2.16*该款产品采用了双排风系统，可以及时、高效的排放机器运行中产生的热量，减缓机器老化过程，持续保持机器稳定的测试状态。（提供证明材料）
2.17*机器采用一体式防震紧固底盘，底盘上安装20mm铸铝板，将光学器件固定在同一平台上，保证光路的一致性，有效提高仪器的稳定性和读数的准确性；（提供证明材料）

3配置要求：

3.1 主机1 台,
3.2 1cm方形玻璃比色皿4 只,
3.3 防尘罩 1只,
3.4 电源线 1根,
3.5 使用说明书 1本,

4工作条件

4.1 环境温度：10℃~30℃；
4.2 室内相对湿度：≤85%；
4.3 供电电源交流电压220V±22V，频率50/60Hz；
4.4 额定功率：120W；
4.5 产品不应受到影响使用的振动和电磁场干扰；
4.6 环境内无腐蚀性气体；
4.7 产品应有良好的接地线。

5优势

5.1 整机质保三年(仪器如在质保期内，有不稳定等现像，厂家以旧换新)
5.2 仪器采用一体化整体开模结果，方便耐用；
5.3 仪器外观颜色采用红黑搭配，有效抗紫外线老化；
5.4 美析的每台仪器都在仪器内加置了10公分的铝板，内部机件都固定在铝板上，试验室条件再恶劣都不会影响仪器的稳定性
5.5 双排风系统，可以实现超长时间待机；

6*专利（需提供证明材料）

6.1 具有“M分光光度计高精度检测系统V1.0”计算机软件著作权
6.2 具有“M光度计的温度监测系统V1.0”计算机软件著作权
6.3 具有“M分光光度计的光电信号检测系统V1.0”计算机软件著作权
6.4 具有“M光度计的分光光路自动校正系统V1.0”计算机软件著作权
6.5 具有专利技术的分光光度计光学系统

第四部分: 客户案例

第五部分:关于我们

上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。

美析主营光谱类仪器：可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、原子荧光光度计、ICP-AES、ICP-MS，生命科学仪器：超微量分光光度计、全自动核酸提取仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。

美析非常重视人才的引进和培养，人的因素是一个企业可持续发展的核心因素，所以美析充分尊重每一位员工，做到真正的“共建平台，实现自我”。为此美析建立了强大的培训团队，对在职员工进行全方位的培训，帮助员工制定职业生涯规划，以期公司和员工共同发展。同时美析以“家庭、敬业、学习”的职业操守启迪着员工，每一个美析人都以饱满的热情和专业的技能完，美呈现每一台仪器、服务每一位客户。对人才的重视和尊重使公司的各个环节都充满着严谨和激情，全新的设计理念、对高精度高参数的苛刻要求、应用范围的持续延伸，所有这些都在我们的产品先进性上得到了完美呈现；从原材料的严格验收，到各工艺流程的标准流水线作业，再到质检部门的严格出厂检测，美析人对生产各环节的苛刻要求使得公司建立起一套完善的过程质量控制系统，并在仪器的质量上得到有力体现。也因此使我们的产品受到国内外用户的一致好评。

美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在上海、北京、江苏三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。

伴随着美析跻身全球品牌仪器行列步伐的加快，美析对自身的要求不断提高，同时我们也希望能得到社会各界的关爱和支持，让我们携手共同展望。科技，必将因你我而改变。