出口食品中对羟基苯甲酸酯的测定

2022-11-16 17:51:45 月旭科技（上海）股份有限公司

适用范围

适用于苦瓜、苹果、肉罐头、苹果酱、豆沙馅料、醋、酱油、豆瓣酱、牛奶、乳味饮料、胡萝卜汁、橙汁和碳酸饮料等食品中对羟基苯甲酸酯含量测定（该实验选用基质为可乐和苹果）

参考标准：《SN/T 4047-2014 出口食品中对羟基苯甲酸酯的测定》

提取步骤

（a）可乐

称取试样5.0g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加入2mL乙酸铵溶液震荡摇匀，加入2g氯化钠，15mL乙腈，涡旋混匀2min，于4500r/min离心5min，将乙腈层转至100mL浓缩瓶中，残渣中加入10mL乙腈，重复提取两遍，合并乙腈，于40℃氮吹至近干，用甲醇定容至1mL，过0.22μm滤膜，待测。

（b）苹果

称取试样5.0g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加入2mL乙酸铵溶液震荡摇匀，加入2g氯化钠，15mL乙腈，涡旋混匀2min，于4500r/min离心5min，将乙腈层转至100mL浓缩瓶中，残渣中加入10mL乙腈，重复提取两遍，合并乙腈，于40℃氮吹至近干，加入2mL 35%甲醇溶液，待净化。

SPE净化步骤

SPE小柱：月旭Welchrom® C18小柱，规格：500mg/3mL；

活化：5mL甲醇，10mL水，弃去；

上样：全部上样，弃去；

淋洗：3mL水，弃去，压干；

洗脱：5mL洗脱剂，收集；

洗脱液于40℃氮吹至近干，用甲醇定容至1mL，过0.22μm滤膜，待测。

色谱条件

色谱柱：月旭UItimate® XB-C18，4.6×150mm，3μm。

流动相：A：水-B：甲醇，梯度；

流速：1mL/min；

柱温：30℃；

进样量：10μL；

波长：260nm；

梯度表：

时间/min	A%	B%
0	60	40
5	60	40
15	40	60
30	40	60

色谱图或者加标回收率结果

图1. 对羟基苯甲酸酯混标1mg/L图谱

峰名称	保留时间	峰面积	峰高	相对峰面积	拖尾因子	塔板数
	min	mAU*min	mAU	%	EP	（USP）
对羟基苯甲酸甲酯	5.890	0.9662	2.25	18.27	0.96	1127
对羟基苯甲酸乙酯	11.903	0.9636	2.71	18.22	1.00	6733
对羟基苯甲酸异丙酯	16.158	0.8621	3.31	16.30	1.00	23336
对羟基苯甲酸丙酯	17.128	0.8724	3.55	16.50	1.05	29768
对羟基苯甲酸异丁酯	22.077	0.7672	2.14	14.51	n.a	23102
对羟基苯甲酸丁酯	22.795	0.8564	2.28	16.20	n.a	22173

图2. 可乐样品空白图谱

图3. 可乐样加标0.2mg/kg图谱

图4. 苹果样品空白图谱

图5. 苹果样加标0.2mg/kg图谱

基质	名称	加标水平 mg/kg	平均回收率	RSD % （n=2）
可乐	对羟基苯甲酸甲酯	0.2	99%	4.74%
	对羟基苯甲酸乙酯		99%	2.79%
	对羟基苯甲酸异丙酯		97%	3.51%
	对羟基苯甲酸丙酯		96%	0.40%
	对羟基苯甲酸异丁酯		100%	5.16%
	对羟基苯甲酸丁酯		105%	4.96%
苹果	对羟基苯甲酸甲酯		76%	3.51%
	对羟基苯甲酸乙酯		88%	2.98%
	对羟基苯甲酸异丙酯		81%	3.94%
	对羟基苯甲酸丙酯		86%	1.73%
	对羟基苯甲酸异丁酯		88%	0.31%
	对羟基苯甲酸丁酯		91%	4.18%

加标回收率表

相关产品信息

货号	名称	规格
00504-11005	SPE小柱	Welchrom® C18，500mg/3mL，50pk
00837-05006	50mL螺口尖底离心管	离心管一次性离心管，平盖，锥形底，RCF12000xg，袋装，未灭菌，50mL，50/包
00837-05002	15mL螺口尖底离心管	离心管一次性离心管，平盖，锥形底，RCF12000xg，袋装，未灭菌，15mL，50/包
00824-31001	Welch 固相萃取装置	12位方缸
00821-32291	盖子+垫片	预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖中心孔6mm 100pk
00821-40927	样品瓶	2mL 透明短螺纹广口样品瓶带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk
00201-21041	液相色谱柱	UItimate® XB-C18，4.6×150mm，3μm
00826-M168P250	对羟基苯甲酸甲酯	A2S, CAS:99-76-3, 250mg
00826-E085P250	对羟基苯甲酸乙酯	A2S, CAS:120-47-8, 250mg
00826-I067P100	对羟基苯甲酸异丙酯	A2S, CAS:4191-73-5, 100mg
00826-P252P250	对羟基苯甲酸丙酯	A2S, CAS:94-13-3, 250mg
00826-B130P250	对羟基苯甲酸丁酯	A2S, CAS:94-26-8, 250mg