食品中的氯霉素有多大危害？该如何检测？

仪器：HPMS-TQ三重四极杆液质质联用仪

色谱柱：Alphasil VC-C18, 2.1 × 100 mm, 2.5 μm, 100 Å

流动相：水-甲醇

图1. HPMS-TQ三重四极杆液质质联用仪

①  典型谱图及灵敏度

以鸡肉为基质，按照《GB/T 20756-2006》测定步骤进行鸡肉样品的提取和净化，得到的空白基质通过0.22 μm滤膜进行过滤，加入1倍定量限（氯霉素浓度为0.3 μg/kg、甲砜霉素和氟苯尼考浓度为3 μg/kg）的标准品溶液，添加一定体积的氘代氯霉素溶液，使得内标浓度为0.1 ng/mL。结果见图2，氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及氘代氯霉素响应值完全能满足要求。

图2. 3种目标化合物及内标xic色谱图

②  方法重现性

在鸡肉基质中添加1倍定量限（氯霉素0.3 μg/kg、甲砜霉素和氟苯尼考3 μg/kg）的标准品溶液，进行9次重复性实验，峰面积相对标准偏差在1.36%-2.97%之间（见图3），说明本方法精密度良好。

图3. 3种目标化合物重复性检测结果

③  样品加标回收率

在鸡肉样品处理前添加3个浓度水平：1倍定量限（氯霉素0.3 μg/kg 、甲砜霉素和氟苯尼考3 μg/kg）、2倍定量限（氯霉素0.6 μg/kg 、甲砜霉素和氟苯尼考6 μg/kg）以及10倍定量限（氯霉素3 μg/kg 、甲砜霉素和氟苯尼考30 μg/kg），并添加一定体积的氘代氯霉素溶液，使得内标浓度为0.1 ng/mL，回收率范围为92.1%-111.1%，具体回收率结果见图4。

图4. 3种目标化合物回收率检测结果

④  标准曲线

取不同体积的标准工作液，用空白样品提取液配制成甲砜霉素和氟苯尼考浓度范围为0.5~10.0 ng/mL的基质混合标准曲线工作液以及氯霉素浓度为0.05 ~1.0 ng/mL的基质混合标准曲线工作液。添加一定体积的氘代氯霉素溶液，使得内标浓度为0.1 ng/mL，结果如下图所示，利用内标法做标准曲线，在线性范围内线性良好，相关系数R²>0.99。

图5. 3种目标化合物标准曲线图

采用HPMS-TQ三重四极杆液质质联用仪，根据《GB/T20756-2006可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，以鸡肉为基质，建立了完整的测定方案。该方法具有灵敏度满足要求，结果准确，重复性好等特点。