【解决方案】LC-5510检测人参产品中人参皂甙分析的应用

现已明确知道的GS单体约有40余种,如Re、Rg、Rf、Rb、Rc等。因此人参皂甙的含量是评价人参质量的重要指标。《中国药典》和GB/T 22996-2008均采用液相色谱法对人参中人参皂甙的成分及含量进行测定，有利于全面、有效的评价人参的质量。

本文对比了2015版《中国药典》和《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》两种分析方法对6种主要人参皂甙的测定。

实验设备和试剂

LC-5510液相色谱

    P-101A高压输液泵

    LC-5510紫外检测器

    LC-5510柱温箱

    DM-101在线脱气机

人参皂甙对照品（Re，Rg1，Rf，Rb1，Rc，Rb2）

人参粉样品

甲醇（色谱纯）

乙腈（色谱纯）

样品处理：

色谱条件1：

参照《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》

色谱柱：C₁₈柱，250mm×4.6 mm，5μm

流速：1mL/min

柱温：45℃

检测波长：203nm

进样量：20μL

流动相：A：乙腈；B：水，按表1梯度洗脱

表1 梯度洗脱程序

图1 色谱条件1—人参皂甙标样谱图

图2 色谱条件1—人参样品谱图

表2 色谱条件1人参皂甙的保留时间列表

色谱条件2：

参照2015版《中国药典》

色谱柱：C₁₈柱，250mm×4.6 mm，5μm

流速：1mL/min

柱温：35℃

检测波长：203nm

进样量：20μL

流动相：A：乙腈；B：水，按表3梯度洗脱

表3 梯度洗脱程序

图3 色谱条件二人参皂甙标样谱图

图4 色谱条件2—人参样品谱图

表4  色谱条件2人参皂甙的保留时间列表

《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》标准中的分析方法，Re和Rg₁不能完全分离，但分析方法时间短，仅需30min.

《中国药典》的参考方法各组分离度较好，但是分析时长需要100min。

通过实验结果与《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》中的方法比较，说明：

1. 提高柱箱温度可以缩短分析时间；

2. 不同厂家的色谱柱对人参皂甙的分离有差异；

3. 增加有机相（乙腈）比例，可明显缩短分析时间；

4. 在增加乙腈比例缩短分析时长的同时，会影响到人参皂甙各组分的分离度，并且人参样品中的其他组分会影响目标组分的分离；

5. 《GB/T22996-2008 人参中多种人参皂甙含量的测定 液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》中的分析方法还可进行优化，在保证满足分离度的情况下，通过调整流动相梯度程序和柱温，可进一步改善分析方法，缩短分析时间。

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