GB31660.4-2019：牛奶中醋酸甲地孕酮和醋酸甲羟孕酮残留量测定

接下来，小编带大家走进安谱实验室

一起来学习具体检测方案吧~

牛奶基质：

取试样2g，于50 mL离心管中，加内标外标工作液（样品基质空白加40ul 100ppb内标，样品基质加标加入40ul 100ppb内标+40ul 100ppb混合外标，使最终检测浓度为20ppb）加0.2mol/L乙酸铵缓冲液4 mL，涡旋混匀后加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶（货号CFEQ-4-150001-0002）40μL，于37℃下避光水浴低速振荡，酶解16h。

试样经酶解后，加乙酸乙酯10 mL，于旋涡振荡器上剧烈振荡10 min， 4000 r/min离心5 min，取上清液至梨形瓶中。残渣加乙酸乙酯10 mL重复提取1次，合并上清液，50℃旋转蒸发至干。加乙腈10 mL、正己烷5ml使溶解，转至50ml离心管中，低速涡旋10s，3000 r/min离心2 min，弃正己烷层，下层液于50℃旋转蒸发至干，加30%甲醇水溶液3 mL，溶解，备用待上样。

SBEQ-CA3279  CNW Poly-Sery MCX 混合型强阳离子交换 SPE 小柱 60mg， 3mL/50pcs

活化：3mL甲醇

平衡：3mL水

上样：待测液

淋洗：3mL水，3mL50%甲醇水，淋洗后抽干

洗脱：5mL甲醇

浓缩：氮吹吹干，用0.2 mL乙腈（80%）-0.1%甲酸溶液溶解残余物，涡旋混匀，过0.22 μm滤膜，供高效液相色谱-串联质谱仪测定。

三、LCMS/MS测定条件

液相条件

色谱柱：Athena C18（2.1*50mm，1.8um）

柱温：30℃

进样量：10ul

流动相：

时间	A: 0.1%甲酸水	B: 0.1%甲酸乙腈
0min	80	20
0.5min	80	20
3min	10	90
3.5min	80	20
7min	80	20

质谱参数

离子源： ESI

扫描方式：正离子模式

检测方式：MRM

电离电压：4000V

离子源温度：100℃

雾化温度：330℃

定性定量离子

醋酸甲地孕酮：385/267（定性定量）385/325（定性）

甲羟孕酮乙酸酯（醋酸甲羟孕酮）：387/285（定性）387/327（定性定量）

甲地孕酮乙酸酯-D3：388/270（定性定量）

四、实验谱图

1. 标品谱图（20ppb）

2. 牛奶基质空白谱图

3. 牛奶基质加标20ppb

五、实验数据

基质	样品 名称	醋酸甲地孕酮 加标回收率	醋酸甲羟孕酮 加标回收
牛奶	加标1	85%	99%
	加标2	91%	100%
	平均值	88%	100%

注：本次实验牛奶基质空白中未检测到醋酸甲地孕酮，醋酸甲羟孕酮的含量为0.095ug/kg 。

六、实验耗材 

本次实验所用耗材如下，供大家参考：

货号	名称	规格	品牌
SBEQ-CA3279	CNW Poly-Sery MCX 混合型强阳离子交换 SPE 小柱	60mg， 3mL/50 pcs	CNW
CDCT-C14861300	乙酸甲地孕酮（醋酸甲地孕酮） 标准品	纯品型，有证书，0.1g	Dr
CDCT-C14852015	甲羟孕酮乙酸酯（醋酸甲羟孕酮） 标准品	纯品型，有证书，0.1g	Dr
CDAA-S-590046D3-JA-1ml	甲地孕酮乙酸酯-D3（GB 31660.4-2019）	100mg/L于乙腈，1ml	ANPEL
CAEQ-4-014048-4000	HPLC级乙酸乙酯	4L	CNW
CFEQ-4-150001-0002	β-葡萄糖醛苷酸酶，>100，000units/ml，芳基硫酸酯酶<20，000units/mL	2mL	CNW
SBEQ-CG1012	CNW G系列12位固相萃取真空装置	玻璃缸（内）长*宽*高=16.2*7.5*15.5cm，12位	CNW
SCAA-104	有机相尼龙针式滤器 （绿色）	13mm*0.22um， 100 只/ 罐	ANPEL
QBAA-002012	2ml 无针注射器	100 只/ 包	ANPEL
ABEQ-3300002-25	CNW 50ml 尖底离心管	25/袋	CNW
ADEQ-2600111	3ml 塑料巴斯德吸管、160mm、未灭菌	500/ 箱	CNW
VAAP-32009E-1232A-100	CNW 9mm 透明螺纹口自动进样瓶( 带刻度、书写)	2ml，12*32mm， 9mm，100 只/ 盒	CNW

关于安谱实验

安谱实验简介

上海安谱实验科技股份有限公司，于1997年组建成立，总部位于上海，目前拥有500多位员工，是中国领先的实验用品供应链管理服务商，同时是一家集研发、生产与销售以及客户供应链管理为一体的综合性企业。

主要产品

主要产品包括化学试剂、标准品、气相色谱相关耗材、液相色谱相关耗材、样品前处理产品、实验室通用耗材、小型仪器等。

热线电话：400-863-0099 

电商平台：www.anpel.com.cn

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