全自动固相萃取-高效液相色谱法质谱联用测定水中双酚A

2020-03-27 05:25:48 睿科集团股份有限公司

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什么是双酚A

双酚A（bisphenol A，BPA）具有优异的表面活性，被广泛用于化妆品和个人护理用品、工业清洗剂及乳化剂、纺织品及皮革处理剂、生物杀灭剂的生产等，主要通过工艺进入到环境中。这类化合物具有强烈的亲脂性，因其化合物结构与动物及人类的雌性激素相似，一旦进入动物及人体内会干扰内分泌的正常作用，是典型的内分泌干扰物（EDCs）。目前，双酚A检测存在各行各业中，常用的检测方法是GC/MS或GC/MS-MS测定，由于酚类极性较强、高沸点的特点，往往需要样品衍生化等繁琐前处理过程，难以适应快速分析的需要。近年来，液相色谱-质谱（LC/MS）方法因灵敏度高且无需样品衍生化，在内分泌干扰物分析中应用越来越广泛。

本文通过全自动固相萃取仪，富集净化水中双酚A，通过高效液相色谱法-质谱联用仪测定。

检测方法

仪器、耗材

AutoSPE-06Plus 全自动固相萃取系统；

Agilent 1260高效液相色谱仪，Agilent6410四级杆质谱仪；

C18固相萃取小柱（Waters Sep-pak 500 mg/6 mL）；

甲醇（Sigma，色谱纯），超纯水（MerckMillipore Aquelix 5，德国）。

样品制备

依次用甲醇10 mL、水10 mL分别以3.0、5.0 mL/min的速率活化/平衡和淋洗C18固相萃取柱，备用。取水样1000 mL，调节水环境为pH为6，加入5 mL甲醇，以10mL/min的速率经C18固相萃取小柱富集后，用10mL甲醇以2.0mL/min的速率洗脱，收集的样品经35℃ 12psi条件下浓缩至0.25mL后，纯水定容至1.0mL，供LC/MS分析。

固相萃取净化条件

全自动固相萃取仪	睿科Auto SPE-06Plus全自动固相萃取系统
固相萃取柱	C18固相萃取小柱（Waters Sep-pak 500mg/6mL）
活化	甲醇，水
洗脱	甲醇

fig.1 Reeko AutoSPE-06Plus 全自动固相萃取仪

fig.2 Reeko AutoSPE-06Plus 固相萃取双酚A的方法

液相色谱 / 质谱联用仪条件

色谱条件：AgilentEC-C18柱（2.7μm×3.0×50mm），柱温：30℃；流动相等梯度洗脱：A 为水45%，B为含0.1%氨水的甲醇55%。流速量为0.2 mL/min，进样量为10 µL。

质谱条件：电喷雾离子源（ESI），负离子模式，电喷雾电压：4000 V；离子源温度：350 ℃；雾化器压力：15psi；气窗气流速：10 L/min；驻留时间：20 min。多反应（MRM）监测，监测离子对为双酚A, m/z 227.0 / 212.0、227.0 / 133.1，如下图所示，定量离子对为227.0 / 212.0。

fig.3 双酚A标准品的MRM色谱图

fig.4 双酚A标准品的MRM色谱图

fig.5 双酚A标准品的MRM色谱图

结果与讨论

在不含有双酚A的空白纯水中加入低、中、高3种加标量的BPA标准液，采用fig.2中样品制备法进行富集，液质联用测定，每个加标量平衡4次，计算所得平均回收率与精密度，结果见表1。

从表1 可以看出，BPA有良好的回收率和精密度，平均回收率在89.6%～ 94.7%之间，RSD%值在4.9 ～7.1之间。表明该方法具有很好的精密度和灵敏度，可以满足痕量检测的要求。

表1. 加标回收率和精密度

实际废水测试，采取饮用水进行分析，结果表明饮用水中BPA含量在2.9 µg/L，低于目前饮用水水质标准限定值0.1mg/L，可以正常食用。

总结

AutoSPE-06Plus能够自动的完成整个固相萃取流程，从活化到上样，清洗样品瓶，洗脱一步到位，并且带自动浓缩，省时省事；
AutoSPE-06Plus采用全自动操作，固相萃取过程中可以排除操作带来的误差，能够获得手动固相萃取无法达到的RSD水平；
AutoSPE-06Plus能够实现高通量处理，能够同时处理6个水样，真正为实验人员节省宝贵的时间与精力。