【全新应用手册】使用安捷伦384孔微孔板进行基于图像的细胞毒性筛选

安捷伦 384 孔微孔板，以其独特的设计和卓越的性能，成为细胞毒性筛选的新宠。它拥有四倍于传统 96 孔板的孔数，大大提升了实验通量。这意味着在相同的时间内，可以完成更多的实验，从而加速药物研发的进程。

不仅如此，这款微孔板还具备出色的成像性能。190 μm 的极薄底部，配合先进的成像技术，使得细胞图像清晰可见、细节丰富。无论是细胞形态、荧光强度还是分布情况，都能得到精准的记录和分析。

在实际应用中，研究人员可以通过安捷伦 384 孔微孔板，轻松完成细胞接种、药物添加和细胞观察等步骤。结合自动化液体处理系统，实验过程更加高效、准确。同时，通过优化实验条件和参数，如细胞接种密度、药物暴露时间等，可以进一步提高筛选的准确性和可靠性。

Figure 2 T47D - 红细胞的高分辨率成像。将细胞固定、染色，并用 40 倍物镜的 Agilent BioTek Cytation C10 共聚焦成像仪对细胞进行成像，以证明微孔板与共聚焦成像的相容性。图像显示了有助于评估治疗应答的详细细胞特征

Figure 3 红细胞用氯雷他明处理或不处理 24 小时。处理后，用安捷伦 eTox Green 染色 30 min。细胞用 4% 多聚甲醛固定，使用 10 倍物镜，使用安捷伦 BioTek Cytation 5 多模式细胞成像仪进行成像。

实验通过测量绿色荧光细胞（即死细胞）的增加来监测药物化合物引起的细胞毒性。实验结果显示，随着暴露时间的延长或药物浓度的增加，发出绿色荧光的细胞数量增加，表明细胞毒性增强。

作为实验优化和验证步骤，细胞暴露于已知有毒物质（如他莫昔芬和三氯苯甲胺）后，观察到绿色荧光细胞数量显著增加，证实了该方法的有效性。

在最高浓度的氯雷他明暴露下，几乎所有观察到的细胞都发出绿色荧光，且细胞核几乎没有红色荧光（TRITC），表明高浓度的氯雷他明对细胞具有极强的毒性作用。

Figure 4 复合库监测。将接种于 Agilent 384 孔微孔板中的 t47d - 红细胞暴露于一个小的化合物库中，每种化合物的最终浓度均为 25 μM。然后将 Agilent eTox Green 加入最后 60 分钟，用 4% 多聚甲醛固定细胞，使用 Agilent BioTek Cytation 5 多模式细胞成像仪，在 TRITC 和 GFP 通道中使用 4 倍 WFOV 相机进行成像。细胞分析用于计数每孔 GFP (死亡) 和 TRITC 阳性 (活) 对象。数据表示为随时间推移的死亡与存活计数比值。数据表示 4 次重复的平均值和标准差。

实验结果显示，安捷伦 384 孔微孔板结合先进的成像技术，能够实现对细胞毒性的快速、准确评估。通过对比活细胞和死细胞的荧光强度，研究人员可以精确计算出死/活细胞比率，从而评估每种化合物的细胞毒性。这种方法不仅提高了实验效率，还为药物研发提供了重要的参考依据。

值得一提的是，安捷伦 384 孔微孔板还具有高度的可重复性和可扩展性。这意味着实验结果稳定可靠，可以多次重复验证。同时，微孔板的设计灵活多变，可以根据实验需求进行定制，满足不同领域的研究需求。

实验过程中，我们还采用了自动化液体处理系统，实现了试剂添加和洗涤循环的自动化，大大提高了实验效率和准确性。此外，我们还通过优化实验条件和参数，如细胞接种密度、药物暴露时间等，进一步提高了细胞毒性筛选的准确性和可靠性。