2024-03-15 10:57:14, 赛默飞生命科学 赛默飞世尔科技生命科学产品
一元复始,万象更新。
三月伊始,赛默飞秉承不断创新的信念,推出多款分子生物学研究新工具,涉及单细胞研究、RNA-Seq、滚环扩增和基于多重置换扩增的全基因组扩增等领域。新的一年,不断推陈出新,加速您的科学研究。
Invitrogen™ SuperScript™ IV模板转换反转录预混液
Invitrogen SuperScript IV 模板转换反转录预混液可在 cDNA 合成反应中提供高模板转换效率。其为方便的预混液形式,包含 SuperScript IV 反转录酶、RNase 抑制剂以及其它反转录反应所需组分。只需加入 RNA 模板、RT 引物和模板转换寡核苷酸(TSO)即可开始反应。
专为获取高质量全长 cDNA 而设计
包含独有增强子,提高模板转换效率
出色的灵敏度,可轻松检测低丰度靶标(低至单个细胞或 2 pg 总 RNA)
包含细胞裂解缓冲液,可进行直接 cDNA 合成,无需提取 RNA
SuperScript IV 模板转换反转录预混液包含独有的模板转换增强子,以及充分利用 SuperScript IV 反转录酶的末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)活性,可提供更强的模板转换效率。当反转录酶到达 RNA 模板的 5'' 端时,TdT 活性会在 cDNA 末端添加 1-3 个额外的核苷酸,使得模板转换寡核苷酸能够结合,并在所得到的 cDNA 的 3'' 端上加入已知序列(图1)。这种 cDNA 可用于 PCR 扩增、通过实时定量 PCR 进行基因表达分析,或作为 5'' RACE、RNA-seq 或第二链 cDNA 合成的模板。该预混液兼容宽范围的总 RNA 起始量(从 2 pg 到 4 µg),并且随附提供裂解缓冲液,可直接从哺乳动物细胞(每个样本1-1,000个细胞)合成 cDNA。
图1. 模板转换反转录和 cDNA 预扩增示意图
SuperScript IV模板转换反转录预混液与各种反转录引物和自己设计的模板转换寡核苷酸兼容。我们同时可提供模板转换寡核苷酸和捕获寡核苷酸(dT)引物,两者都含有与预扩增引物互补的相同 adapter 序列。或者,您可以选择 SuperScript IV单细胞/低起始量 cDNA 预扩增试剂盒,其包含了进行模板转换 cDNA 合成和预扩增所需的一套完整试剂。
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Thermo Scientific™ EquiPhi29™ DNA 扩增试剂盒
Thermo Scientific EquiPhi29 DNA 扩增试剂盒包含快速、灵敏及高效进行等温 DNA 扩增所需的所有组分,如进行滚环扩增(RCA)和基于多重置换扩增的全基因组扩增(MDA-WGA)。
两小时内快速进行 DNA 扩增
灵敏度低至 1 fg 起始 DNA
可获得高达 17 µg 的扩增 DNA
兼容不同类型的起始样本材料(如经纯化的 DNA,液体培养物、琼脂平板菌落等)
兼容多种下游实验应用,如 DNA 测序(Sanger 测序、二代测序)、内切酶酶切、无细胞 DNA 富集和无细胞蛋白表达
试剂盒内包含 EquPhi29 DNA 聚合酶,其为一种独有的 phi29 DNA 聚合酶突变体,具有强链置换活性、高热稳定性、快速反应速度、高产量和低扩增偏好性。同时试剂盒内包含经优化的反应缓冲液、外切酶抗性随机引物、焦磷酸酶和 dNTP。焦磷酸酶的加入可增强 DNA 扩增以及促进样本处理。
滚环扩增(RCA)
RCA 过程涉及使用环状 DNA 模板,通常是质粒或环状寡核苷酸的形式。模板通过 DNA 聚合酶(如 phi29 DNA 聚合酶)进行扩增,该酶结合到模板上合成新的 DNA 链。当 DNA 聚合酶在环状模板上移动时,它不断合成新的 DNA 拷贝,从而进行指数级扩增。这个过程可以多次重复,可从少量起始样本中扩增得到大量的 DNA。
图2. 滚环扩增(RCA)是一种等温扩增技术,利用 phi29 DNA 聚合酶等链置换 DNA 聚合酶,从环状 DNA 模板扩增得到长的单链 DNA。RCA 生成的串联体包含与环状模板互补的大量串联重复序列
基于多重置换扩增的全基因组扩增(MDA-WGA)
MDA-WGA 使用具有高持续合成能力的 DNA 聚合酶,如 phi29 DNA 聚合酶,以恒定温度扩增 DNA。该过程首先将随机六聚体引物加入到 DNA 样本中,引物与模板 DNA 杂交,并启动 DNA 合成。
图3. 基于多重置换扩增的全基因组扩增(MDA-WGA)示意图
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