自动化高通量PCR解决方案

2023-02-09 17:47:47, 赛默飞生命科学 赛默飞世尔科技生命科学产品


自动化高通量PCR解决方案

在当今的科学研究环境中,尤其在高通量样本的合成生物学,精准医疗或而二代测序领域,越来越多的实验室正在寻求自动化工作流程,提高实验的准确性、重复性和实验效率。赛默飞为您提供灵活可靠、性能稳定的自动PCR解决方案,包括自动化PCR仪, Platinum II Taq热启动酶以及专为自动化设计的硬边框PCR板等。

Applied Biosystems™

自动化PCR仪(ATC)

ATC为您提供全新的自动化PCR工作流程解决方案。不论您现在拥有自动化液体处理系统,还是将来计划中,ATC都是您的最佳拍档。

设计小巧,节省空间 

● 小巧的模块设计,节省实验台空间

● 独立的控制模块:可选10 cm、1 m和3 m线缆,允许将控制模块置于加热模块仪下面,放在桌子下面或远至3米位置,空间管理更灵活

● 自动化热盖,热盖向前滑动覆盖反应板槽,允许前方、上方、 侧向上样

● 兼容全裙边或半裙边反应板

通过易于安装的软件,与您的自动化系统完全整合

● 采用SiLA Rapid Integration标准兼容软件,轻松对接不同品牌如Beckman Coulter, Hamilton, Tecan, Thermo Fisher等的自动化系统,内置预设应用程序界面(API),适用于大多数自动化平台

● 在接入您的自动化系统之前,您可以使用我们提供的免费ATC demo软件提前进行测试

Invitrogen™ Platinum II Taq

热启动酶

PCR仪技术的发展使得PCR扩增的通量大幅增加,因此对相应PCR试剂的性能提出了更高的要求,需要在不影响扩增质量的情况下更方便、更快速的完成PCR实验流程。Invitrogen最新的Platinum II Taq热启动DNA聚合酶,专为高通量PCR而设计,可省掉反应优化步骤,支持快速扩增,以及允许多个PCR反应同时进行扩增。

当需要使用多个不同的PCR反应来快速分析大量样本时,需要克服多个挑战。每个PCR的反应条件均需要进行优化,但每个PCR反应的最优反应条件可能不一致。首先,不同的PCR反应通常需要不同的引物退火温度。其次,不同的扩增子长度可能不一致,需要的延伸时间也会不一样。所以,当使用传统PCR试剂时,不可能同时运行多个不同的PCR反应,只能依次进行,需要花费很多时间。

创新型的Platinum II Taq 热启动DNA聚合酶可解决这些难题。经改造的Taq酶可实现快速DNA合成。Platinum II PCR缓冲液的“共稳定分子”能在退火步骤增强模板引物复合物的稳定性,增强反应特异性,因而无需对每对引物的退火温度进行优化,不同的PCR反应可以使用同样的退火温度(60 ℃)和灵活的延伸时间。

使用Platinum II Taq热启动DNA聚合酶,多个不同PCR反应可以同时进行

创新性Platinum II PCR缓冲液可实现使用统一的退火温度

多反应同时扩增可极大节约时间

快速的扩增方案,大大缩短循环时间

常规Taq 酶的扩增速度为60 s/kb,所以单个PCR反应需要长达一个多小时。Platinum II Taq热启动DNA聚合酶经改造优化,扩增速度为15 s/kb。从下图结果来看,使用Platinum II Taq,一次完整的PCR反应时间为36 min,而其他聚合酶需要1小时以上,且扩增速度的加快并不会影响反应的特异性。

快速合成速度可减少PCR运行时间。使用不同品牌DNA聚合酶从50 ng人类基因组DNA中扩增529 bp的片段。(A) Sigma-Aldrich KAPA2G™ Fast HotStart PCR Kit, (B) NEB OneTaq Hot Start DNA Polymerase, (C) Promega GoTaq™ G2 DNA Polymerase, (D) Toyobo Quick Taq™ HS DyeMix, (E) Roche FastStart Taq DNA Polymerase, (F) Sigma-Aldrich JumpStart™ Taq DNA Polymerase.

高通量PCR反应所需的反应稳定性

Platinum II Taq热启动DNA聚合酶所使用的抗体热启动技术可抑制室温下DNA聚合酶的活性。在此我们测试了室温下配制好反应体系后,即刻进行PCR和放置24 h后再进行PCR的结果差异。从下图结果可看出,室温放置24 h后,Platinum II Taq的特异性和灵敏度没有发生变化。

室温下PCR反应的稳定性。使用Platinum II Taq热启动DNA聚合酶,分别从0, 0.016, 0.08, 0.4, 2, 10, 50, 250 ng人类基因组DNA中扩增735 bp的片段。

通过以上实验对比,可看出Platinum II Taq热启动DNA聚合酶特别适用于高通量PCR。具有不同Tm值的引物可在同一个PCR循环中扩增不同长度的扩增子,扩增速度比常规PCR酶快2倍以上,且PCR反应体系可在室温下保持稳定。总之,Platinum II Taq热启动DNA聚合酶可在同一循环中同时进行多个不同的PCR反应,提高了方便性和快速性的同时,有助于增加PCR扩增的通量。

Applied Biosystems™

MicroAmp™ EnduraPlate PCR板

您在为自动移液工作站寻找可以匹配的PCR耗材吗?是否担心热循环后PCR板发生变形或不易取下?机械臂抓取是否容易造成扭曲?

我们向您推荐专为自动化设计的Applied Biosystems MicroAmp EnduraPlate PCR反应板。

采用双色注塑成型技术,反应板框架由聚碳酸酯制成,具有更高的机械强度,可耐受PCR反应过程中的温度变化和机械臂的抓取压力,使高通量PCR和qPCR应用可实现连续的工作流程;而反应孔采用与标准板相同的聚丙烯制成,确保优异的贴合和热传递。

如果您曾遇到过反应板在运行结束后粘在PCR仪模块上,并需要使用刮刀将反应板撬下来的情况,那么您可能会比较熟悉这个问题。聚碳酸酯框架不会发生变形,意味着Endura PCR反应板易于从PCR仪上取下,并且可在PCR结束后保持平整;因此,这些反应板可用于自动化和高通量工作流程的任意下游步骤中。

我们提供多种产品形式,兼容市场上主流PCR仪和荧光定量PCR仪型号。

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