Taq Talk第六期 | TaqMan检测设计小贴士

2023-02-06 10:26:12, ABI 赛默飞世尔科技生命科学产品


在上一期Taq Talk中,我们学习了如何高效地选择合适的qPCR预混液。在本周第六期的课程中,我们来了解TaqMan检测设计小贴士。


TaqMan检测设计小贴士

良好的寡核苷酸设计是实时荧光定量 PCR 的最重要参数之一。这正是众多研究人员选择购买 TaqMan Assay 产品的原因——这些引物和探针采用了成熟可靠的算法设计,获得了全球科学家的信赖,适用于实时荧光定量 PCR。

如果您选择设计您自己的实时荧光定量PCR引物,需要切记以下四点:

1

扩增片段的长度应约为 50–150 bp,因为较长的产物无法实现高效扩增;

2

不要将引物或寡核苷酸探针设计在错配或已知的多态性位点上,这可能会导致在最初的几个PCR循环中结合效率低下,并使CT值向右移动;

3

要注意设计的序列是否是特异的。特别要注意同源序列,它们通常与靶标序列差别很小,可能会导致错误的信号。尽量针对某区域设计至少一条特异性足够的寡核苷酸,使您的检测不会产生不需要的信号;

4

不要针对低复杂度的序列设计寡核苷酸,比如基因组或转录组中肯定不是唯一存在的重复区域。

Applied Biosystems™具备超20年的TaqMan产品研发制造经验,我们为您提供MGB探针、QSY探针等多种TaqMan解决方案,同时可为您提供专业的生物信息学技术支持。


此外,Applied Biosystems™ TaqMan® Assay系列产品包括靶标特异性引物和一个或多个探针,使用通用的反应程序,基于最新转录组与基因组信息,可提供超2100万种预设计检测,为基础科研和转化研究用户提供基因表达、基因分析、拷贝数研究、miRNA、突变检测、蛋白分析等应用的完整qPCR解决方案,保障优良的扩增效率和检测表现。

点击观看视频,跟Darlene一起学习TaqMan检测设计小贴士。

☛ 点击文末“阅读原文”,了解Applied Biosystems TaqMan检测解决方案。 


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