商业化细胞培养基使用前需要重新添加L-谷氨酰胺吗？在线等，挺急的

近日，Dr. 赛发现，有一些小伙伴在培养细胞时，会遇到细胞状态不好的情况，同样的体系，之前细胞状态一直很好，怎么这次就不给力了呢？小编在论坛上也进行了搜索，发现遇到类似问题的科研er还真不少。

经过Dr. 赛的缜密分析，发现“元凶”竟然有可能是“L-谷氨酰胺降解”！

L-谷氨酰胺是细胞培养必需的一种氨基酸，参与其他氨基酸的形成，核酸、蛋白质合成和葡萄糖生产。通常来说，添加到培养基中的L-谷氨酰胺在4度存放时相对比较稳定，如果含有L-谷氨酰胺的液体培养基一直在4度避光保存，一般情况下在有效期内不需要补加。但如果存储不当，在高于 4°C 的温度下，细胞培养基中的 L-谷氨酰胺会自发降解，从而影响细胞生长，这种情况下可能需要补加L-谷氨酰胺。

敲黑板划重点：添加了L-谷氨酰胺的培养基一定要严格按照4度避光保存。

不过，都2022年了，有一种好东西可以帮你完美避开L谷氨酰胺降解的坑，那就是gibco GlutaMAX！

什么是GlutaMAX?

L-谷氨酰胺不稳定，不仅可能引发细胞生长问题，且降解会生成有细胞毒性的副产物氨，从而影响蛋白质糖基化，减低细胞存活率，减少蛋白产量。

Gibco GlutaMAX是L-谷氨酰胺的二肽形式（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺），在水溶液中极为稳定，在长期储存和培养过程中不会自发降解（图1），减少氨的生成（图2），从而提高培养基的稳定性，最大程度减少有毒成分氨的累积，优化细胞性能。较低的氨浓度有利于提高细胞产率，尤其是对氨毒性敏感的细胞。

备注：此添加剂适用于哺乳动物细胞培养。建议不要用于昆虫细胞培养。

图1. DMEM培养基中Gibco GlutaMAX添加剂和L-谷氨酰胺的稳定性比较。向DMEM中分别加入GlutaMAX添加剂和L-谷氨酰胺，分装成小瓶后于37℃下存储。每天取样置于-20℃冻存。利用HPLC法测定GlutaMAX添加剂和L-谷氨酰胺的浓度水平。

图2. 含添加剂培养基中的氨水平。向DMEM中分别加入GlutaMAX添加剂和L-谷氨酰胺，分装成小瓶后于37℃下存储。每天取样置于-20℃冻存。利用HPLC法测定氨水平。

GlutaMAX可提供多样产品选择

GlutaMAX添加剂溶液：

GlutaMAX添加剂可作为独立的产品使用。在您当前的细胞培养体系中，可直接使用浓度为200 mM的GlutaMAX添加剂溶液替代等摩尔浓度的L-谷氨酰胺。

GlutaMAX液体培养基：

您可以直接使用已添加GlutaMAX的液体培养基产品，有多种组分可供选择 ：DMEM、DMEM/F12、MEM、IMDM、RPMI、Opti-MEM等。

BenchStable室温储存培养基：

新品室温培养基可以为您提供灵活便利的细胞培养方案，有四种组分可供选择：DMEM、DMEM/F12、MEM、RPMI，每种组分均添加GlutaMAX，且无需冷藏，方便您随时随地取用。

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