KingFisher加速食品病原微生物安全检测，10小时搞定？

2023-01-28 12:07:33, 赛默飞生命科学赛默飞世尔科技生命科学产品

2007年“奶粉阪崎肠杆菌超标”事件

2011年“牛肉膏”事件

2012年“老酸奶工业明胶”事件

2013年“麦当劳福喜腐肉”事件

2014年“粪水臭豆腐”事件

2016年“餐企食品检出罂粟壳成分”事件

牛羊肉掺假事件

名贵中药材掺假事件

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近年来，各种食品安全事件频繁发生，食品安全问题已经成为大家关注的焦点之一。如何快速、高效、准确地检测出食品中潜在的危险因素，以防范食品安全事故的发生，是当前食品安全监管工作中最重要和最具挑战性的问题之一。

食品安全检测的技术手段多样，随着分子生物学的快速发展，以PCR或者定量PCR技术为核心的分子检测方法，具有速度快、操作简单、检测灵敏度高、结果准确可靠等优点，还能实现高通量自动化检测，在病原微生物检测、物种真实性鉴定、转基因检测等方面，已经成为目前主要的技术手段。

病原微生物检测

在众多食品安全事件中，病原微生物导致的食品安全事件占大多数。大肠杆菌O157:H7是食源性疾病的最主要病因，可引起腹泻、出血性肠炎，溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等严重的并发症等。自1982年美国首次发现因该致病菌引起的食物中毒以来，肠出血性大肠杆菌O157:H7疫情开始逐渐扩散和蔓延至全球范围。依据1999年的评估，美国每年发生73000例感染，并造成61人死亡。

显微镜下的大肠杆菌O157:H7，图片来源：extension.org

大肠杆菌O157：H7的传统培养法检验程序需要经过增菌、平板培养及多项生化、血清学鉴定，通常耗时4-5天，难以满足快速出结果的需求。

来自GB 4789.36-2016 食品安全国家标准食品微生物学检验

采用免疫磁珠捕获法可以有效地富集样品中的微生物，可比常规检测方法减少大量培养时间，节省约一天时间，降低杂菌背景，提高检出率。该方法已获美国环保署 (EPA) 和美国官方分析化学师协会 (AOAC) 的认可，同时也是我国相关政府部门认定的检测标准。

来自GB 4789.36-2016 食品安全国家标准食品微生物学检验

结合免疫磁珠捕获法和PCR/qPCR法，使用KingFisher自动磁珠纯化仪，在增菌培养阶段使用免疫磁珠进行富集，接着使用磁珠法试剂进行细菌DNA提取，通过PCR或qPCR进行检测，可以在一天内得到检测结果。该方法可以减少手工操作的强度和时间，很大程度避免人工误差，提高灵敏度，可检测低至1CFU/25mg 大肠杆菌O157 样本，对于10CFU/25mg 大肠杆菌O157样本，检出率可达到100％。

PCR/qPCR检测方法可用于各种常见病原微生物的检测，包括大肠杆菌O157、李斯特菌、沙门氏菌、军团菌、肉毒梭菌、诺如病毒等。

物种真实性鉴定

近年来，食品掺假的事件也屡见不鲜，特别是肉类和中药材掺假，对物种真实性进行快速准确的检测对于鉴别掺假显得十分重要。与免疫学检测技术相比，PCR检测不需要特异性抗体，合成引物所需时间远远少于特异性抗体的制备，且DNA比蛋白质热稳定性更高，qPCR检测已成为检测食品掺假量的一种优势选择。