2022-11-19 17:50:46 上海安谱实验科技股份有限公司
产品介绍
免疫亲和柱是一种利用抗原-抗体特异性结合的前处理柱,其原理主要为:抗体与凝胶结合形成固相化载体,样品通过免疫亲和柱时目标物与抗体结合,非目标物不会结合而直接通过亲和柱,之后通过淋洗去除非目标物,最后加入洗脱液将目标物洗脱下来,该产品广泛用于食品、中药、饲料等行业。
近年来营养品类乳铁蛋白、维生素B12、免疫球蛋白等检测关注度持续增加,除已推出的肝素免疫亲和柱,安谱实验根据食品中维生素B12的测定(GB 5009.285-2022)、奶及奶制品中免疫球蛋白IgG的测定(TTDSTIA003-2021)开发对应的产品,持续为您奉上优质新品!
产品特点
✔️ 柱容量高
✔️ 流速快
✔️ 操作简单
✔️ 完全满足国标、团体等标准
✔️ 适用于食品等基质特别是奶制品
产品应用
1.奶粉中维生素B12的测定
样品前处理:
基质:奶粉
称取试样 2.5g( 精确到 0.01g) 置于 50mL 离心管中,加入 VB12 标准品混匀,将 20mL 已预热到 60℃的水加入到样品中使其溶解,溶解后冷却至室温,用水定容至 25mL,摇匀,4000 rpm 离心 15min,准确吸取下层液20mL 于干净容器中,备用。
小柱操作:
维生素 B12 免疫亲和柱,SBBB-CC55002,3mL/25pcs
上样:上述溶液以约 1-2 滴 /s 的流速缓慢通过亲和柱
淋洗:上样液下降至柱体时(未完全流干),用 10mL 水淋洗,弃去全部流出液,并使 2-3mL 空气通过柱体
洗脱:1mL 甲醇,控制流速约为 1 滴 /s, 收集全部洗脱溶液于玻璃试管,加入 1mL 水混匀供 HPLC 分析。
2.牛奶中免疫球蛋白的测定
样品前处理:
基质:液态奶、奶粉
称取 5 g 样品,用 pH 7.0 PBS 溶液定容至 50 mL,混匀,超声 10 min。
① 于 10000 r/min 离心 15 min,吸取 20 mL 中间层试液于另一 50 mL 离心管中,作为上样液。
② 或将提取样本用纤维滤纸(SCEQ-GF07110)过滤,准确吸取滤液 20 mL 于另一 50 mL 离心管 中,作为上样液。
小柱操作:
SBBB-CC55004,Protein G 免疫球蛋白亲和柱(HP 柱),1 mL;
活化 :10 mL pH 7.0 PBS 溶液活化亲和柱,调节压力使其流速约 2 mL/min(1 滴 /s)通过亲和柱,直至液面下降到亲和柱管体(未完全流干);
上样 :将上述前处理后的 20mL 上样液,在重力或负压作用下,缓慢通过免疫亲和柱,流速大约 1滴 /2s,直至样品全部通过亲和柱;
淋洗 :用10 mL pH 7.0 PBS 溶液洗涤亲和柱上多余的杂质,适当给一些压力,控制流速以 2-3 mL/min(1~2 滴 /s),直至样品全部通过亲和柱,并排干淋洗液;
洗脱 :用 5 mL 洗脱液(pH 2.5 甘氨酸溶液)洗脱亲和柱,在重力作用下或负压作用下,缓慢通过免疫亲和柱,控制流速以 1 mL/min(1~2 滴 /2 秒),直至样品全部通过亲和柱,并排干洗脱液,收集全部 5 mL 洗脱液,注入 HPLC 检测。
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备注:详细的应用方案请登录安谱实验官网下载
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