2022-09-19 20:01:54, 纳谱分析
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赭曲霉毒素A(图片来源于网络)
赭曲霉毒素A是真菌毒素之一,是由赭曲霉及青霉菌等产毒菌株侵染粮食、食品、饲料及其他农副产品后所产生的一种有毒代谢产物,它的毒性主要有肾脏毒、肝毒、致畸、致癌、致突变和免疫抑制作用。赭曲霉毒素A广泛存在于谷物、油料及其制品、调味品、酒类等食品中。
纳谱分析的SelectCore OTA免疫亲和柱可为赭曲霉毒素A的快捷有效检测提供强有力地支持。
适用范围
本方法参照GB 5009.96-2016 食品安全国家标准 食品中赭曲霉毒素A的测定 第一法 免疫亲和层析净化液相色谱法,适用于谷物、油料及其制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品、葡萄干、胡椒粒/粉中赭曲霉毒素A的提取与检测。
实验步骤
一 / 溶液配制
磷酸盐缓冲液:称取8.0 g氯化钠、1.2 g磷酸氢二钠、0.2 g磷酸二氢钾、0.2 g氯化钾溶解于约990 mL水中,用浓盐酸调节pH至7.0,用水稀释至1 L。
2%乙酸甲醇溶液:准确吸取2 mL乙酸,使用甲醇定容至100 mL。
二 / 样品制备
称取试样5.0 g(精确到0.1 g),加入20 mL 60%乙腈水溶液,超声30 min,4000 r/min离心10 min,移取4 mL上清液加入26 mL磷酸盐缓冲液混合均匀,混匀后于4000 r/min离心10 min,取上清液备用。
三 / 固相萃取方法
SelectCore OTA免疫亲和柱3 mL
(1)亲和柱预处理:取亲和柱,恢复至室温(22-25 °C),亲和柱连接于注射器下,打开下端堵头,将柱内保存液流尽;
(2)上样:准确移取样品制备中的上清液,注入注射器中,使溶液以约1滴/s的流速通过免疫亲和柱,直至空气进入亲和柱中;
(3)淋洗:依次用10 mL磷酸盐缓冲液、10 mL水先后淋洗免疫亲和柱,流速为1 滴/s~2 滴/s,弃去全部流出液,抽干亲和柱;
(4)洗脱:准确加入2 mL 2%乙酸甲醇溶液,流速约为1 滴/s,收集全部洗脱液于干净的离心管中,于45 ℃下氮气吹干。用流动相溶解残渣并定容到1 mL,过0.45 μm尼龙针式滤器,供检测用。
四 / 液相色谱-荧光检测器条件
Column:ChromCore C18 5μm, 4.6×150mm;
Mobile Phase:48/51/1 v/v/v乙腈/水/冰乙酸
Flow rate:1.0 mL/min
Temperature:35 °C
Injection:50 μL
Detection:
EX:333 nm
Em:460 nm
实验谱图
△图1 赭曲霉毒素A标准品、玉米面粉样品、玉米面粉样品加标对比图
加标回收率
五 / 实验结论
根据色谱图及加标回收率结果可以看出,ChromCore C18色谱柱可快速、准确的对含有赭曲霉毒素A的样品进行分析;SelectCore OTA免疫亲和柱可特异性吸附赭曲霉毒素A,并且回收率符合检测要求。
相关产品信息
常规规格货号 | |
产品描述 | 货号 |
ChromCore C18 5μm, 4.6×150mm | A001-050018-04615S |
SelectCore OTA免疫亲和柱3mL | OTA100-030300-2 |
保护柱及柱芯 | |
产品描述 | 货号 |
ChromCore C18保护柱柱芯5μm, 4.6x10mm | A001-050018-04601S |
保护柱卡套(分体式,带连接件) | Guard-04601S-CS |
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申请方法如下:
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