色谱小知识:如何让液相色谱分析事半功倍

2022-08-21 21:00:58 艾杰尔-飞诺美(Agela & Phenomenex)


色谱柱效率是在快速运行方法的同时保持分离质量的平衡。当高效液相色谱分析快速运行时,我们就有更多的时间运行更多的方法,最终节省系统停机时间和总体成本。今天,我们向您介绍三种简单的方法以使您在提高HPLC方法的速度的同时可以保持高质量的分析结果。

 色谱柱长度 

多数情况下,这可能提高方法速度最简单的方法。HPLC色谱柱越短,运行时间越短,意味着更多的样品可以更快地通过色谱柱,从而使分离过程加快。然而,色谱柱越短,峰分离度也会随之降低。因此,平衡色谱柱长度和分离度对分离结果至关重要。


     Xccelerator提示:

即使色谱柱长度缩短,也可以保持分离度。关键是要确保满足分析需求和主峰与杂质峰的分离度,我们也可以通过选择合适粒径的硅胶颗粒来实现这些目标。


 粒径 

固定相颗粒越小,U/HPLC色谱柱的效率和灵敏度越高。需要注意的是,粒径越小,系统背压越高,因此,这也意味着我们需要在保证分析结果的前提下在粒径、色谱柱长度和背压的选择之间找到平衡。


     Xccelerator提示:

一种解决HPLC系统中压力增加的方法是选择核-壳颗粒的色谱柱。核壳颗粒是由内部的实心核以及包裹在实心核外层的多孔硅胶层组成,由于其更高的均一性,更低的传质阻力,可带来更高的柱效,更低的背压以及更快速的分析效率。


 流动相流速 

提高HPLC方法速度还可以通过提高流动相的流速来实现。当流动相流速增加时,分析物会更快地通过色谱柱,从而缩短分析时间。


同样,由于流速的增加会降低色谱柱的效率,因此在不影响色谱柱效率的情况下,确定提高系统速度的最佳流速非常重要。这可以通过参考Van Deemter(范德姆特方程)曲线来实现。


     Xccelerator提示:

当HPLC分析速度提高时,一天中可以运行更多的样品,从而提高实验室的整体工作效率。然而,分析成功的关键还是要综合考虑色谱柱长度、粒径和流速三个要素,在分析实验过程中找到最适合的色谱条件从而达到最优异的实验结果。


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