2022-06-10 13:36:47, 安捷伦科技 安捷伦细胞分析事业部(BioTek)
仪器及配件
仪器:BioTek 全光谱酶标仪。
配件:Take 3 板(可进行 16 个样品检测)或者 Take 3 Trio 板(可进行 48 个样品检测)。
操作流程
以检测 dsDNA 为例进行操作流程介绍,具体如下:
1►
软件中增加 A260/A230 数值
软件默认检测 260nm 和 280nm 处吸光值,自动计算 A260/A280 纯度比,若想查看 A260/A230 纯度比值,需要在软件上进行设置。
注:对于纯的 dsDNA,A260/280 比值应该在 1.8-2.0,A260/230 比值 ≥2.0 。A260/230 比值偏低指征样品中可能有苯酚、胍、碳水化合物等残留。
打开软件,在菜单栏点击“Take3”,选择“Nucleic Acid Sample Types”
弹出下方对话框,点击“New”
按照下图参数进行设置,勾选“Sencondary Ratio Wavelength”,默认波长为 230nm,设置完成后,检测样品时会自动采集 260nm、280nm 和230nm 处的吸光值,并在结果中自动显示 A260/A280 和 A260/230 比值。
注:对于 dsDNA Extinction Coefficient 数值为 50 ,ssDNA 为 33 ,RNA 为 40 。
2►
在 Take 3 或者 Take 3 Trio 上加样品
以 Take 3 为例介绍
Take 3 可检测 16 个样品,可使用排枪进行加样,每个样品点处加 2ul 样品,不要有气泡。最少设置两个孔为 Blank ,进行背景扣除。完成后轻轻盖上,防止液体飞溅。
注:使用溶解 dsDNA 的 buffer 作为 Blank :如使用 TE buffer 溶解,则使用 TE buffer 做 Blank 。
3►
开始检测
将 Take3 板放置于 BioTek 载板台上,Take 3 A1 位置与仪器载板台 A1 位置对齐。
打开 Gen5 软件,在 Task Manager 中“Read Now”处选择“Nucleic Acid Quantification”进入核酸检测界面。
Sample type 选择 dsDNA+A230 。
在 Well Type 中选择“Blank”,最少设置两个孔为 Blank 孔。软件会以 Blank 孔的平均值进行背景扣除。若 Blank 孔的 CV% 超过 10% ,软件将进行提醒,且不进行样品检测,直至 Blank 孔 CV% 在 10% 以内。在 Well Type 中选择“Sample”,进行检测样品的设置,若有重复,可在 Repication 处进行设置。
设置完成后,点击 Read 和 OK 。仪器进行 Blank 孔吸光度检测,完成后点击 Approve ,Blank 孔 OD260 原始数值将导出到 Excel 中。
注:检测完成后,结果将自动导出到 Excel 中,因此,电脑上要装上 Office 哦。
点击 Read,进行核酸样品检测,完成后点击 OK ,数据导出到 Excel 中。完成所有样品检测后,点击“End of Batch”,导出批量汇总结果。
完成实验后可点击 File-Save 保存实验。
取出 Take 3 板子,用无尘纸将板子和盖子上液体擦拭干净即可。
关于BioTek
BioTek是世界领先的多功能微孔板检测仪及软件的研发生产公司,拥有54年的悠久历史。BioTek的Synergy系列多功能微孔板检测仪拥有灵活的功能配置和优异的检测结果,配合友好强大的操作软件,为广大用户提供了便捷高效的使用体验。服务科学,促进科学始终是我们追求的目标。2019年BioTek加入安捷伦科技有限公司,成为细胞分析事业部的重要组成成员。
安捷伦科技有限公司(纽约证交所:A)是生命科学、诊断和应用化学市场领域的全球领导者,致力于为提高生活质量提供敏锐洞察和创新经验。安捷伦的仪器、软件、服务、解决方案和专家能够为客户最具挑战性的难题提供更可靠的答案。2020财年,安捷伦的营业收入为53.4亿美元,全球员工数为16,400人。
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