不加有机相也能进行ADC分析？沃特世Premier SEC系列色谱柱来帮您！

2022-04-26 19:31:50 沃特世科技（上海）有限公司

沃特世于2022年1月25日正式发布了第二代SEC — Premier SEC系列色谱柱。让我们先通过视频来分享一下产品的技术特点。

此外，我们还将通过4期特色应用的阐述，更详细地描述产品在SEC-MS（点击此处查看Premier SEC系列色谱柱如何助力蛋白SEC-MS分析)、ADC、双抗和单抗分析中的定位。本期内容我们将和您分享ADC应用。

图1. 流动相中加入乙腈，消除ADC色谱峰拖尾（100 mM磷酸盐，pH=6.8）。

正在进行ADC SEC方法开发的您，是否遇到过避不开峰形拖尾的问题，是否经历过加有机相的难题？小分子的加合反应，使ADC的疏水性明显增加，因此，需要加入疏水性强的溶剂来抵消SEC色谱峰拖尾（图1所示）。但这一思路并不完美，因为它可能产生相应的风险：

加入有机相会增加盐析的风险，提高维护成本；
有机相的存在增加了ADC降解的风险，影响数据可靠性；
会增加SEC平衡及更换保存溶剂的时间。

针对ADC分析的这些痛点，Premier SEC色谱柱可以提供更好的解决方案。与常规SEC相比，它有以下特色：

聚合物和片段的分离度更高；
流动相中即使不加有机溶剂，仍可得到对称的色谱峰。

图2. ADC分离对比色谱图（Premier SEC（2.5 μm, 上图）与硅胶基质SEC（2 μm，下图）；色谱条件：2 x PBS，0.57 mL/min，UV@280 nm）。

Premier SEC

图3. Premier SEC产品示意图

Premier SEC是沃特世2022年新推出的体积排阻色谱柱。它对色谱柱的各个方面都进行了革新：

新型键合相，Premier SEC填料与羟基化的聚环氧乙烷键合，键合相的非极性作用更低；因此，即使不加有机相，也会有对称的峰形；
孔径设计更合理，因此同样的流动相，峰展宽也更小，分离度也更高。

图4. 不同色谱柱开发ADC方法时有机相的影响。

Premier柱管技术，采用Premier柱管，消除了蛋白的极性相互作用，流动相不再需要高浓度的盐。与其它柱管技术相比，回收率更高。

图5. 不同品牌色谱柱分析ADC的色谱图，Premier SEC的回收率更高。

采用抗体标准品进行色谱柱质控控制，重现性有明确保证。

图6. Premier SEC分析ADC的7个批次考察色谱图。

END

综上所述，Premier SEC为ADC拖尾问题提供了更完善的解决方案。它采用Premier技术处理柱管，降低了抗体的极性吸附作用；聚环氧乙烷键合相，则屏蔽了ADC的非极性吸附作用。这两个技术的结合，让ADC的方法开发更简单，方法运行更稳定。相信Premier SEC能经受各种ADC样品的考验，成为ADC方法的首选。

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