No.204｜出峰太快，猝不及防？一招增强高极性化合物保留

YoYo老师对高尔夫球场排水处等环境样品和食品中作为杀菌剂而广泛使用的有机磷系农药进行分析，由于C18色谱柱难以保留，所以使用金刚烷基键合色谱柱（ADME色谱柱）对有机磷农药保留行为进行分析。

金刚烷基具有10个C原子，具有与钻石相同的特殊笼状分子结构。金刚烷基团通过乙基作为连接，使乙基金刚烷基团键合在硅胶基质上形成填料，从而开发出新型填料柱CAPCELL PAK ADME。

有机磷农药以及高极性农药分析

对在C18色谱柱上保留困难的高极性农药类物质[含有季铵盐类农药百草枯、敌草快、六亚甲基四胺（HMT）、矮壮素、有机磷系农药]分别在Positive模式和Negative模式下进行分析。流动相设定为5%甲醇开始的梯度条件。ADME色谱柱和C18色谱柱的保留时间差值以[保留时间差值#]表示。

【液相条件】

色谱柱：CAPCELL PAK ADME（3μm 2.1 mm i.d. x 150 mm）

            传统C18填料色谱柱（3μm 2.0 mm i.d. x 150 mm）

流动相：Positive，10 mmol/L HCOONH4(pH 3) / CH3OH = 95 / 5

            Negative，0.1 vol% HCOOH / CH3OH = 95 / 5

流   速：200 μL/min

温   度：40 ℃

检测器：MS ESI

进样量：1 μL

图1　农药类化合物常规C18和ADME色谱柱分析比较图（上：Positive、下：Negative）

使用ADME色谱柱和普通C18色谱柱在同一条件下对农药类化合物进行分析，草甘膦、三乙磷酸铝保留时间相近，其他农药在ADME色谱柱上保留时间比C18色谱柱有明显延长，并且，原本在C18色谱柱上没有保留的草铵膦，在ADME色谱柱上也获得了一定保留。

根据上述实验，ADME柱对具有极性基团的化合物保留更强。而图1结果显示出ADME柱对不含有极性基团的化合物保留情况与C18柱相近，因此ADME柱更适合对包含部分极性化合物的多种农药类物质进行同时分析。

氨基糖苷抗生素类农药

春日霉素、井冈霉素和多抗霉素B为具有糖配体的氨基糖类抗生素，在农作物种植时被广泛使用。本实验对该类化合物的保留时间进行探讨。

由于井冈霉素试验法（农作物）中要求使用键合C30固定相的色谱柱进行分析，因此本实验使用CAPCELL PAK ADME色谱柱和其他公司C30色谱柱进行对比，分别在中性流动相条件（方法指定条件）和酸性流动相条件下，比较分离保留情况。

中性流动相条件下（甲醇2%）分析比较

【液相条件】

色谱柱：2.0或2.1 mm i.d. x 150 mm

流动相：10 mmol/L CH3COONH4 / CH3OH = 98 / 2

流   速：200 μL/min

温   度：40 ℃

检测器：MS ESI Postive

进样量：2 μL

图2　中性流动相条件下氨基糖苷类农药分析谱图

中性流动相条件下，井冈霉素在C30色谱柱上保留时间更长、ADME色谱柱在得到井冈霉素同样保留时间的基础上，其他成分得到了更长保留。

酸性流动相条件下（甲醇5%）分析比较

【液相条件】

色谱柱：2.0 或 2.1 mm i.d. x 150 mm

流动相：10 mmol/L HCOONH4（pH 3）/ CH3OH = 95 / 5

            0.1 vol% HCOOH / CH3OH = 95 / 5 (多抗霉素B)

流   速：200 μL/min

温   度：40 ℃

检测器：MS ESI Postive

进样量：1 μL

图3　酸性流动相条件下氨基糖苷类农药分析谱图

C30色谱柱几乎保留不住、ADME色谱柱有一定保留

以上氨基糖苷类抗生素农药的分析说明，ADME色谱柱在中性以及酸性流动相条件下均可完成测定。当分析实际样品时，可根据实际样品中杂质分离情况设定流动相条件，提高分离。

总结

金刚烷基团键合填料ADME色谱柱，在分析保留弱的高极性农药类化合物时，保留时间较C18柱、C30柱更长。常规C18色谱柱保留分离困难的情况下，可使用ADME色谱柱作为反相分析第二选择来进行尝试。

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