Spherisorb SAX分析依诺肝素钠的使用维护技巧

2021-11-09 17:16:34, Waters 沃特世科技（上海）有限公司

依诺肝素钠是一种低分子量的肝素制剂，临床上称为低分子肝素，它具有很强的抗血栓形成作用和一定的溶解血栓作用，在临床上应用广泛。欧洲药典10.0中收载了该品种的检测方法 — 使用阴离子交换色谱柱。阴离子交换色谱柱在使用维护方面与常规反相柱有所区别，今天小编给大家介绍一下阴离子交换色谱柱Spherisorb SAX的使用维护技巧。


依诺肝素钠色谱条件



方法来源：Ep 10.0 依诺肝素钠


保护柱：Spherisorb SAX，5 µm，4.6 × 10 mm（P/N:PSS830055）

色谱柱：Spherisorb SAX，5 µm，4.0 × 250 mm（P/N:PSS845305）     

流动相A：0.028%磷酸二氢钠（磷酸调pH 3.0）

流动相B：0.028%磷酸二氢钠-14%高氯酸钠（磷酸调pH 3.0）

柱温：50℃


图1. Ep 10.0中依诺肝素钠分析的色谱条件


色谱柱使用维护技巧


1
搭配保护柱使用

柱芯（3/pk，P/N:PSS830055）+保护柱套（P/N:PSS830008）；保护柱安装视频可在如下路径查找：沃特世技术服务公众号 — 耗材应用 — 常见问题 — 色谱柱和保护柱的安装（操作视频） — Spherisorb保护柱的安装。

2
活化方法
色谱柱出厂保存溶剂：(10:90  —  甲醇:水)，新柱先用超纯水冲洗，流速0.5 mL/min，然后再用流动相B及流动相A:流动相B=97:3冲洗，各2小时。
3
样品制备
酶解样品先离心再过滤，注意滤膜与稀释剂兼容性。  
4
流动相

流动相均为缓冲盐，建议每2天连瓶更换，避免长菌；可使用激光笔检查流动相是否正常。

图2. 使用激光笔检查流动相状态
5
冲洗及保存
冲洗时不要关闭柱温，冲洗结束另设方法关闭柱温；超纯水0.5 mL/min冲洗2小时后，然后用甲醇或乙腈冲洗5-10倍柱体积并保存。


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