Spherisorb SAX分析依诺肝素钠的使用维护技巧

2021-11-09 17:16:34, Waters 沃特世科技(上海)有限公司


依诺肝素钠是一种低分子量的肝素制剂,临床上称为低分子肝素,它具有很强的抗血栓形成作用和一定的溶解血栓作用,在临床上应用广泛。欧洲药典10.0中收载了该品种的检测方法 — 使用阴离子交换色谱柱。阴离子交换色谱柱在使用维护方面与常规反相柱有所区别,今天小编给大家介绍一下阴离子交换色谱柱Spherisorb SAX的使用维护技巧


依诺肝素钠色谱条件



方法来源:Ep 10.0 依诺肝素钠


保护柱:Spherisorb SAX,5 µm,4.6 × 10 mm(P/N:PSS830055)

色谱柱:Spherisorb SAX,5 µm,4.0 × 250 mm(P/N:PSS845305)     

流动相A:0.028%磷酸二氢钠(磷酸调pH 3.0)

动相B:0.028%磷酸二氢钠-14%高氯酸钠(磷酸调pH 3.0)

柱温:50℃


图1. Ep 10.0中依诺肝素钠分析的色谱条件


色谱柱使用维护技巧


1
搭配保护柱使用

柱芯(3/pk,P/N:PSS830055)+保护柱套(P/N:PSS830008);保护柱安装视频可在如下路径查找:沃特世技术服务公众号 — 耗材应用 — 常见问题 — 色谱柱和保护柱的安装(操作视频) — Spherisorb保护柱的安装。

2
活化方法
色谱柱出厂保存溶剂:(10:90  —  甲醇:水),新柱先用超纯水冲洗,流速0.5 mL/min,然后再用流动相B及流动相A:流动相B=97:3冲洗,各2小时。
3
样品制备
酶解样品先离心再过滤,注意滤膜与稀释剂兼容性。  
4
流动相

流动相均为缓冲盐,建议每2天连瓶更换,避免长菌;可使用激光笔检查流动相是否正常。

图2. 使用激光笔检查流动相状态
5
冲洗及保存
冲洗时不要关闭柱温,冲洗结束另设方法关闭柱温;超纯水0.5 mL/min冲洗2小时后,然后用甲醇或乙腈冲洗5-10倍柱体积并保存。



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