2021-09-28 19:35:28, Waters 沃特世科技(上海)有限公司
很多做制备的老师都有这样的困扰:
好不容易优化好的方法没法精准放大
制备柱寿命不可预见
珍贵的样品损失,又要返工
色谱柱性能问题的根源:柱床密度
图1:常规高压匀浆法装填的分析柱与制备柱之间的差异。
为了使色谱柱在使用过程中保持稳定的分离性能,就要求柱床必须有足够高的装填密度来承受色谱柱使用过程中的操作压力。从图中可以看出,对于分析型色谱柱来讲,采用传统的高压匀浆填充法就能获得必需的柱床密度。然而,随着色谱柱内径和长度的增加,以及小颗粒色谱填料的应用,传统的制备柱装填技术就得不到所需的柱床密度了。
这些低柱床密度的制备柱导致的直接问题就是从分析到制备不能精确地放大,并且柱寿命很短。
如何提高效率、获得更大通量?
如何确保样品损失少、回收率高?
如何节约成本?
如何应对困难的纯化项目?
有没有一款制备柱能解决这些问题呢?有,那就是沃特世推出的OBD(Optimum Bed Density)制备柱。
OBD制备柱
图2:Waters OBD设计图。
从图中可以看出,采用高压匀浆填充法装填的制备柱的入口端的柱床密度偏低,会导致入口端填料出现断层;而轴向冲压压缩匀浆法装填的制备柱的入口端柱床密度又偏高,这样可能会导致柱床短流,并且会降低柱床的局部渗透性。
沃特世OBD制备柱的设计以及装填工艺可使制备柱柱床具有一致密度,确保入口端的柱床不被过度压缩或扰乱。
OBD—搭建制备柱与分析柱性能的桥梁
■ 可放大性
图3:在SunFire色谱柱上的精确放大(在0.1%TFA中)。
要将在分析柱上分离成功放大到制备柱,需要色谱性能相当的柱子。OBD制备柱的柱床密度和分析柱相当,可以保证分离的可放大性,避免在制备分离时重新开发方法。
■ 可预见的柱寿命
图4:在一根OBD制备柱XBridge C18 5 µm,19×50mm上进样7,000次的结果
OBD设计的制备柱具有极佳的柱床稳定性,不会塌陷,而且柱与柱间性能完全一致,使用寿命大大延长。
从分析到放大不得不了解的公式
■ 放大因子
■ 流速
使用OBD制备级方法转换计算器能够弥补分析级到制备级应用之间的性能差距。
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