手把手教你！动物源性食品中敌百虫、敌敌畏、蝇毒磷残留量测定的前处理方法

敌百虫、敌敌畏、蝇毒磷

敌百虫、敌敌畏与蝇毒磷均属于有机磷农药，作为一种杀虫剂，有机磷农药具有广谱、高效、低毒、使用方便等特点，广泛应用于农业、畜牧业、水产、林业等方面的防虫或杀虫工作。有机磷农药的广泛使用，在给人们增加利益的同时也给环境造成了严重的污染。大量食用含有敌百虫等农药残留的食物会导致机体正常生理功能的失调，引起病理改变和毒性危害。因此，为保障动物源性食品的安全，我国农业农村部和国家市场监督管理总局2019年发布的GB 31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》中明确规定了敌百虫和敌敌畏在牛和猪靶组织中的残留限量。

本文阐述了如何将敌百虫、敌敌畏、蝇毒磷从样品基质中分离提取出来，并经过净化后，转化成液质联用仪可以检测的形式。以提取、净化为重点，依据国标GB 23200.94-2016，为检测人员和相关领域研究人员提供一定的参考。

检测项目：敌百虫、敌敌畏、蝇毒磷

试样的制备与保存

1. 分割肉

取样品中有代表性的约500 g，用组织捣碎机捣碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。

2. 肠衣

取有代表性样品约100 g，用剪刀剪碎至2 毫米以下，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。

3. 蜂蜜

取有代表性样品约500 g，搅拌均匀后装入洁净容器内密封并做好标识。

试样保存与制样要求：分割肉、肠衣、蜂蜜等试样于零下18 ℃ 以下冷冻保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

前处理方法

1.分割肉

准确称取5 g均匀试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞离心管中，加入5 g无水硫酸钠混匀，再加入15 mL二氯甲烷，用均质器（10000 r/min）均质2 min，4000 r/min离心3 min，将有机相转移至100 mL梨形蒸馏瓶中，残渣再用2×10 mL二氯甲烷均质提取两次。离心合并有机相，于40 ℃旋转蒸发至2 mL，将样液转移至5 mL刻度试管中，并用少量二氯甲烷洗涤梨形蒸馏瓶，合并洗涤液到刻度试管中，室温通氮浓缩至干。定量加入1.0 mL乙腈溶解残渣，加入2 mL环己烷旋涡混匀2 min后，2500 r/min离心3 min，将下层乙腈相过0.45 μm微孔滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。

2.肠衣

准确称取5 g试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞离心管中，加入2 g无水硫酸钠混匀，再加入15 mL二氯甲烷，盖上盖混匀，置于超声波清洗器中超声30 min，冷却后将有机相过滤转移至100 mL梨形蒸馏瓶中，残渣再用2×10 mL二氯甲烷混匀超声提取两次，离心合并有机相，于40 ℃旋转蒸发至2 mL，将样液转移至5 mL刻度试管中，并用少量二氯甲烷洗涤梨形蒸馏瓶，合并洗涤液到刻度试管中，室温通氮浓缩至干。定量加入1.0 mL乙腈溶解残渣，加入2 mL环己烷旋涡混匀2 min后，2500 r/min离心3 min，将下层乙腈相过0.45 μm微孔滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。

3.蜂蜜

称取5 g试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞离心管中，加入10 mL水和25 mL乙酸乙酯，于旋涡混合器上混匀1 min，以3000 r/min离心5 min，将上层乙酸乙酯提取液收集于浓缩瓶中，残渣再加入20 mL乙酸乙酯，重复上述操作，合并乙酸乙酯提取溶液。在50 ℃ 以下减压浓缩至约3 mL后转移至10 mL离心管中，用5 mL乙酸乙酯分两次洗涤浓缩瓶，合并洗涤液于离心管中，用氮气吹干。加1.0 mL乙腈溶解残渣，并过0.45 μm微孔滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。

表1  敌百虫、敌敌畏和蝇毒磷信息表