2021-07-01 09:17:03, SCIEX SCIEX
琥珀胆碱(Succinylcholine),临床上常用琥珀胆碱季铵盐的氯化物,即为氯化琥珀胆碱(Succinylcholine Chloride),其代谢物为单胆碱(图1),主要用途是作为兽药或人类外科手术的麻醉诱导剂,以静脉注射或者推注的方式给药。该药曾被列为B级有机剧毒物品。因其具有起效快、毒性大的特点,常被不法分子制成飞镖用于偷狗甚至麻醉抢劫、杀人等。
琥珀胆碱进入基体组织后先被血液中的丁酰胆碱酯酶水解成肌松作用很弱的琥珀单胆碱,之后以组织分布的形式从全血中消除。因琥珀胆碱在血液中半衰期较快,很难在全血中检测到琥珀胆碱原型药物,然而其代谢物琥珀单胆碱在血液中可以较长时间的存在,所以在动物(包括人)中毒之后取血样,需要同时分析检测原型药物琥珀胆碱及其代谢物琥珀单胆碱。本文针对狗血中的琥珀胆碱及其代谢物建立了液相色谱串联高分辨质谱的快速检测方法,在法医鉴定该类化合物提供了重要的参考意义。
A
B
图1、A为琥珀胆碱(分子式C14H30N2O42+),
B为琥珀单胆碱(分子式为C9H18NO4+)
该解决方案的优势和特点
01
详细优化了色谱条件,极性毒物琥珀胆碱和单胆碱具有很好的保留
02
解决了琥珀单胆碱定量干扰问题,采用高分辨的MRMHR扫描模式,使得定量结果更准确
03
推导出琥珀胆碱和单胆碱的二级碎片裂解规律
04
该方法灵敏度高,抗基质干扰强,足以满足法庭科学的定性和定量方法的要求
图2、在狗血基质中添加2 ng/mL浓度子离子提取色谱图
(上图为琥珀胆碱,下图为琥珀单胆碱)
二级质谱裂解规律
琥珀胆碱有两个季铵盐形式的基团,在水溶液中带两个电荷,琥珀单胆碱有一个季铵盐形式的基团在水溶液中带单电荷。本文对该两个化合物的二级碎片的结构进行了推导,为化合物的裂解规律提供一定的信息(图3和图4)。
图3、琥珀胆碱的二级碎片归属图
图4、琥珀单胆碱的二级碎片归属图
采用MRMHR定量有效的避免基质干扰
获取某小区宠物狗中毒之后的血样,在分析检测时发现琥珀单胆碱采用一级精准母离子定量时发现干扰严重,由图5可以,目标物和干扰没有得到有效的分离,导致定量不准确。实验发现目标物琥珀单胆碱和干扰物的二级碎片有很多相似之处(图6),有诸多文献报道采用145碎片离子定量,基质干扰物二级碎片离子中也含有该碎片离子,如果色谱条件选择不合适会导致琥珀单胆碱和干扰物色谱峰重合,最后导致定量不准确。由图6和图7可知,琥珀单胆碱特征碎片99在干扰物中是不含有的,色谱峰提取时,没有干扰峰,最后选择该子离子进行定量分析检测。
图5、某狗血样本中琥珀单胆碱一级精确母离子提取色谱图
图6、狗血样本中琥珀单胆碱和干扰物的二级质谱图
图7、狗血样本中琥珀单胆碱的特征碎片离子99和145提取离子色谱图
小结
本文采用高分辨质谱系统建立了快速分析检测动物血液中琥珀胆碱及其代谢物琥珀单胆碱的液相色谱串联质谱分析方法。该方法详细优化了色谱条件使得目标物保留较好,有效避免基质干扰,并且对化合物的二级碎片裂解规律进行了推导。该实验采用高分辨MRMHR进行准确定量,详细优化了定量离子的选择性,该方法灵敏度高,满足法医鉴定标准的分析要求。该方法针对狗血中的琥珀胆碱及其代谢物的快速检测方法,在法医鉴定领域提供了重要的参考意义。
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