2020-08-22 12:59:12, 岛津实验器材 岛津(上海)实验器材有限公司
生物样本前处理空板使用小技巧
生物样本前处理中为了提高效率往往采用96孔板批量操作模式,但是看似简单的操作,却也隐藏着各种坑。如何避坑?那可是一门大学问!
1
啥?空板也有讲究?
调查发现,在生物样本分析实验室中,空板就是必备物种,项目出现率高达99.9999%。
而且,很多的前处理方法也是直接采用空板进行的,比如空板法蛋白沉淀——空板中加入血样:沉淀剂(1:3-1:5)后涡旋离心取上清;又比如空板法液液萃取——空板中加入预处理后血样:萃取剂(1:2-1:4)后涡旋离心取萃取层。
同时,做完一系列前处理后,上机的承载者依然是我们不可或缺、洁白无瑕的空板宝宝。
既然空板有这么多的用武之地,自然也就有各种各样五花八门的规格所在。
我们最常讨论的是孔部形状,比如圆孔、方孔;底部形状,比如U底、V底。
常规上,我们倾向于使用圆孔板进行需要加样的操作,这是因为圆孔板孔与孔之间间隔更明晰,不容易加错;而在上机进样时更倾向于使用V底板,这是因为V底板的死体积更小,可有效增加少量样本进样次数。
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诶?涡旋时怎么老漏液?
使用空板进行蛋白沉淀或者液液萃取操作时,需要进行涡旋,而盖垫密闭性不足的话容易产生交叉污染、溶胀、溶剂挥发的问题,导致实验失败。同时密闭性不足也容易导致在进样时溶剂挥发而无法重复验证。
那该怎么办呢?
其实你需要的是一款足够匹配、足够密闭的盖垫!
膜的最大问题是溶胶、以及扎针后针口过大。因此硅胶盖垫才是更好的选择。
SHIMSEN系列空板盖垫完全考虑到使用情景的问题,所以整体盖垫十分紧实,虽然摁压比较难,但是全面保障了实验的密闭性。
当然,如果您用的是乙酸乙酯等极易挥发、穿透性强一类溶剂,我司的方孔板系列密闭性会更优于圆孔板系列。
因此尝试顺序应该是:SHIMSEN圆孔板+盖垫 >> SHIMSEN 方孔板+盖垫。。
不建议用膜哦~
进样的时候会不会卡针?
进样后溶液会不会易挥发?
由于部分进样器进样针很粗,在进样的时候存在一定概率的夹针或盖垫被针带起,从而导致进样报错或交叉污染、溶剂泄露等。
选择正确的盖垫,往往能解决更多您意想不到的问题。
我司提供的SHIMSEN系列的互相匹配的空板及盖垫精准匹配,密切贴合,同时硅胶盖垫有一定弹力及阻力,因此保障了进针后盖垫不粘黏。
同时,盖垫进样针处预做薄:既能避免预切口导致的溶剂挥发及交叉污染,又能很好的减小扎针阻力。
3
嗯?数据偏差大,到底是哪里出问题了?
一般出现数据偏差,其实有多种因素导致,但是如果把讨论范围做得太宽,那就没有讨论的意义了。因此我们只讨论在空板端出现的问题。
可能原因一:是不是空板污染了?
污染来源有可能是在使用过程中交叉污染,也有可能是拆开放置后受实验室空气污染。因此我们建议:
1、使用过程中操作尽量留心;
2、采用单块独立塑封的空板,现拆现用。
可能原因二:是不是涡旋不够充分?
由于生物样本中存在大比例的水,而水的表面张力又比较大,因此在做涡旋操作的时候,如果采用方孔板,则有一定概率形成涡旋死角。在氮吹浓缩后复溶时,由于复溶液体积一般比较小,如采用方孔板,也有一定概率形成涡旋死角。最终的结果就是操作不充分、复溶不充分。
因此我们建议,上述两项操作,有条件用圆孔板还是优先圆孔板。
可能原因三:是不是吸附了?
该问题下章详细讨论~
4
哎?吸附问题怎么办?
一般提到吸附,我们会想到什么?
会想到很多,比如多肽类物质;碱性物质;金属敏感性物质(四环素、大环内酯类,兽残,遇金属分解类);细胞培养液、细胞代谢物等;低浓度物质。
上述提到的这一系列物质其实都在“吸附”问题上很“敏感”!
那遇到吸附问题,该怎么办?
消极的办法是:多放置一会,再一会,再一会,让他吸附彻底了,稳定了。但是这只不过是掩耳盗铃罢了。
积极的办法是:有没有低吸附的板?
当然有!我司新推出的SHIMSEN系列低吸附空板,比玻璃材质产品吸附低31%,比市面上PP材质产品吸附低25%。这完全拯救了低点RSD偏大,高点测不准等一系列问题!
偷偷告诉你,价格还不贵。
5
嗨!原来还有这等好货!
SGLC可以提前生物样本分析全套解决方案,当然也包含前文所提及的加样不串孔的圆孔板、进样不费样的V低板、保障洁净度的独立塑封空板、涡旋不漏液的高密闭硅胶盖垫、蛋白多肽低吸附的高性能空板。
除此之外,蛋白沉淀板、磷脂去除板、固液萃取SLLE板、固相萃取SPE板及微量板,还有脂质体定制板~
喔,还蛮全!
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或拨打 400 920 7730 联系我们~往期推荐
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