2019-12-06 11:50:40 北京桑翌实验仪器研究所
细胞培养对无菌操作要求极其苛刻,不仅对环境有极高的要求,对培养器皿品质和清洁度有着极为严格的要求。
在这里,总结了细胞培养中,对玻璃器皿的清洗要求:
一、新的玻璃器皿的清洁:
1.自来水刷洗,除去灰尘。
2.烘干、泡盐酸:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。
3.刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干。
4.泡酸、清洗:用清洁液(重铬酸钾120g:浓硫酸200ml:蒸馏水1000ml)浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,最后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。
5.烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。
6.高压蒸汽灭菌121℃,20-30min。
7.高压灭菌后烘干
二、已经使用过的玻璃器皿的清洁:
1.刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。
1.泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。
2.烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装,以便于灭菌储存及防止灰尘和再次被污染。
3. 高压蒸汽灭菌121℃,20-30min。。(玻璃培养瓶消毒前可将瓶盖轻轻盖上)
5.烘干备用:因为高压消毒后器皿会被蒸气打湿,所以要放入烤箱内烘干备用。
高质量的玻璃器皿是细胞培养的关键因素之一。从下图中我们很容看出高绷硅玻璃(Borosilicate glass)和钠钙玻璃(Soda lime glass)的区别。
因为成分不同,钠钙玻璃和高硼硅玻璃,在性质上有明显的区别:
1,耐温差不同
实验室经常会遇到玻璃制品温度的急剧变化,如:从冰箱里拿到水浴锅中或者从常温直接放到超低温冰箱中等。普通钠钙玻璃会在内外温差超过80℃时会炸裂。高硼硅玻璃则可以耐受160℃以上的温差变化。
2,高温下,水解耐性的区别
在高压蒸汽灭菌过程中,玻璃中的 Na2O, 是最重要的溶出物。高硼硅玻璃在高压灭菌过程中溶出物是明显少于钠钙玻璃的。严格意义上来讲,钠钙玻璃不适用于培养基高压蒸汽灭菌。
细胞培养对条件要求苛刻,目前市面是最流行的细胞培养用玻璃器皿,首推Duran 和 Wheaton。硼硅33玻璃,是目前玻璃界中膨胀系数最下的玻璃制品,其耐温差变化和溶出性均极为优秀。Duran 和 Wheaton 的培养基瓶,贴壁培养用滚瓶,悬浮和微载体细胞培养用飞旋瓶等相关产品,均采用硼硅33玻璃制造。这也是细胞培养领域的客户,推崇Duran和Wheaton玻璃的原因。
北京桑翌实验仪器研究所有大量Duran&Wheaton产品现货供应,欢迎新老客户选购。
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