中药饮片赶黄草,具有清热解毒、退黄化湿、活血化瘀、利水消肿之功效。现代研究表明,赶黄草含有没食子酸和槲皮素,有抗肝病毒和保护肝脏、恢复肝功能、减低饮酒和药物对肝脏的损害之功效,可预防酒精肝、脂肪肝、抑制肝纤维化、肝硬化,并对甲、乙肝炎、慢性肝炎具有良好的治疗作用。本文选取赶黄草杆作为研究对象,用LC-5510型高效液相色谱仪对其没食子酸含量进行测定。该方法操作简单,成本低,对设备要求低,适合中草药饮片制剂厂家将其作为赶黄草的鉴定和质量评价的有效方法之一。
LC-5510型高效液相色谱仪
1. 材料与方法
主要材料与试剂
赶黄草杆,没食子酸标准品,甲醇,磷酸,碳酸氢钠,氨水,乙酸乙酯。
主要仪器与设备
LC-5510型高效液相色谱仪(配有紫外检测器),北京东西分析仪器有限公司;在线脱气机,北京东西分析仪器有限公司。
试验条件
色谱柱:EWAI C18-2 柱(250mmX4.6mm,5μm);
缓冲液:0.05%磷酸溶液;
流动相:甲醇:缓冲液=15:85;
流 速:1.0ml/min,进样量10μL;
柱温:室温;
检测波长:273nm。
标准溶液配制
取没食子酸标准品适量,分别配置浓度为 0.1mg/L、 0.5mg/L、 1.5mg/L、2.0mg/L的标准溶液。
样品制备
赶黄草杆样品烘干后进行粉碎,称取粉末适量,向其中倒入适量沸水,然后恒温水浴1小时,过滤,向滤液中加入适量0.15%碳酸氢钠溶液并用水定容至刻度,吸取该液适量至分液漏斗中,加等体积乙酸乙酯,振荡,静止,吸取下层溶液经0.45μm滤膜过滤,待用。
2. 分析与结果
标准曲线绘制
将0.1 mg/L、0.5mg/L、1.5mg/L、2mg/L的标准溶液,依次进高效液相色谱仪进行分析,标准品色谱图如图1,校准曲线如图2,线性关系为Y=24734.39X+0.00,相关系数为0.99985。
图1 没食子酸标准品谱图