助力“315”，全自动固相萃取-液质法测定动物源性组织中的喹乙醇代谢物

12前言

喹乙醇作为一种饲料添加剂，具有抗菌和促生长的作用，且价格低廉，常用于生产养殖中。但是根据其毒理实验表明，该物质具有光敏毒性、致畸性和致癌性。目

前我国已禁止使用该添加剂用于动物养殖。

3-甲基-喹噁啉-2-羧酸（MQCA）是喹乙醇在动物组织中的代谢标志物。可以用于判断喹乙醇是否用于动物养殖。现使用SPE1000全自动固相萃取系统，对动物源性食品中喹乙醇代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸（MQCA）进行进化，液质法测定回收率。

关键词：SPE1000    喹乙醇    3-甲基-喹噁啉-2-羧酸    动物源

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2.实验过程

2.1仪器与试剂

SPE1000全自动固相萃取系统（莱伯泰科公司）；

MV5多通道平行浓缩系统（莱伯泰科公司）；

3-甲基-喹噁啉-2-羧酸标准溶液：100μg/mL ；

乙酸乙酯（色谱纯）；甲醇（色谱纯）；

乙腈（色谱纯）；蒸馏水；

甲酸（分析纯）；盐酸（分析纯）；

无水硫酸钠（分析纯）；

洗脱液：甲酸：乙酸乙酯=2：98；

固相萃取柱：LabTech  PXA 150 mg/ 6 mL ；

2.2标准贮备液的配置

标准贮备液：取10μL 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸标准溶液加入10mL棕色容量瓶中，用甲醇定容配置成0.1μg/mL标准贮备液。

2.3 实验过程

2.3.1  提取

(1) 取2.0g猪肝样品，加入5g无水硫酸钠，搅匀，加入15mL 2%甲酸乙酸乙酯，涡旋混合，振荡5min，4000rpm下离心2 min，收集上清液；

(2) 将下层残留物用10mL 2%甲酸乙酸乙酯按照步骤(1)重复提取一次，合并两次上清液；

(3) 将上清液在35℃水浴条件下，减压蒸至近干，再加入10mL 2mol/L HCl水溶液超声溶解，转移至15mL离心管中，4000rpm下离心2min，取5mL下层清液，加入50μL标准贮备液，待净化。

2.3.2  全自动固相萃取浓缩过程

将加标样品置于SPE1000的样品架上，按照图1的固相萃取方法进行动物源性食品中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的萃取净化。洗脱液收集在10mL刻度收集管中。

图1 动物源性食品中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸固相萃取方法

2.3.3 浓缩过程

将收集管置于MV5中，浓缩温度40℃，开启氮吹针定时跟随功能。浓缩至近干后，用流动相定容至1mL，待测。

2.3.4液相条件

色谱柱： C18，5μm，4.6*150mm；

流速：1.0mL/min；柱温：35℃；

进样量：20μL；流动相：0.2%甲酸水：乙腈=40：60

2.3.4质谱条件

电离模式：ESI            扫描方式：正离子扫描

检测方式：多反应监测     电喷雾电压：5500 V

雾化气压力：50 psi        辅助气压力：50 psi

气帘气压力：20 psi        离子源温度：500 ℃

定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表

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3.加标回收率结果

通过计算得到该方法中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的加标回收率及平行性结果（见表1）。3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的加标回收率为88.0~97.9%。

表1 测定结果

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4.结论与讨论

本方法用SPE1000全自动固相萃取系统，对动物源性食品中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸进行萃取净化，其加标回收率88.0~97.9%。说明SPE1000固相萃取系统完全符合该方法的应用要求，并且在回收率和平行性上表现优异。

撰稿人：王熙