动物源性食品中5种磺胺类药物的检测

随着社会的快速发展，人们对食品安全问题越来越重视，在每年的“315”主题晚会上都会曝光出一些“食品安全问题”。

今天，我们主要讲述的是动物源性食品中5种磺胺类药物的检测。磺胺类抗生素(SAs)用来防病治病、提高饲料利用率和促进动物生长，广泛用于畜牧业。然而磺胺类药物在动物源性食品中容易残留，人们长期使用这些动物源性食品后，可能造成磺胺类药物在人体内的蓄积。众多资料显示，磺胺类药物残留对人类危害主要有以下四个方面：造成泌尿系统的危害；造血系统反应；致癌性；过敏反应。由此可见对于食品中磺胺类药物残留的检测的重要性！为了消费者健康，必须监控各种动物源性食品药物残留，为此需要可靠的分析方法来监测这些药物残留。

本文参考《GB 29694-2013 食品安全国家标准 动物性食品中13种磺胺类药物多残留的测定 高效液相色谱法》提供动物源性食品中磺胺类药物的检测方法，使用Labtech Sepline-S4全自动固相萃取系统进行鸡肉中磺胺类药物的萃取，并用高效液相色谱进行检测，方法的回收率为81.1%~83.9%，RSD为3.9%~9.2%。通过Sepline-S4全自动固相萃取系统建立的加标回收率及平行性良好，适合鸡肉中磺胺类药物的检测。

关键词

Sepline-S4；Minilab；动物源性食品；磺胺类药物；GB 29694-2013

1仪器设备及试剂

1.1仪器设备

Minilab 全自动稀释配标仪（莱伯泰科公司）；

Sepline-S4全自动固相萃取系统（莱伯泰科公司）；

QH66均质仪（莱伯泰科公司）；

ET 浓缩仪（莱伯泰科公司）；

LC600 二元高压梯度高效液相色谱（莱伯泰科公司）；

固相萃取柱（PXC  200mg/6mL）。

1.2试剂

甲醇、乙酸乙酯、乙腈（色谱纯 FISHER Chemical）；

乙酸、氨水、盐酸（分析纯）；

0.3%乙酸水溶液（体积分数）；

50%甲醇乙腈（体积分数）；

洗脱液：5%氨水甲醇（体积分数）；

流动相：0.3%乙酸水溶液：乙腈=7:3（体积比）；

磺胺类药物标准液：磺胺嘧啶（100μg/mL，甲醇），磺胺二甲基嘧啶（100μg/mL，甲醇），磺胺甲氧嘧啶（100μg/mL，甲醇），磺胺甲恶唑（100μg/mL，甲醇），磺胺喹恶啉（100μg/mL，甲醇）；

磺胺类药物标准工作液：用Minilab按图1方法配制得到浓度为5μg/mL的标准工作液。

图1混标配制方法

2实验过程

2.1样品预处理

称取搅碎鸡肉5g，于50mL聚四氟乙烯离心管中，加乙酸乙酯20mL，10000r/min均质3min，涡旋混合2min，4000r/min离心5min，取上清液于60mL收集瓶中，残渣中加乙酸乙酯20mL，重复提取一次，合并两次提取液。

2.2样品加标

在2.1提取液中加入20μL的5μg/mL磺胺类药物标准工作液，样品的加标浓度为20 ng/g。

收集瓶中加0.1mol/L盐酸溶液4mL，于40℃下氮吹浓缩至少于3mL，转至10mL离心管中。用0.1mol/L盐酸溶液2mL洗收集瓶，转至同一离心管中。再用正己烷3mL洗收集瓶，将正己烷转至同一离心管中，涡旋混合30s，3000r/min离心5min，弃正己烷。再次用正己烷3mL洗收集瓶，转至同一离心管中，涡旋混合30s，3000r/min离心5min，弃正已烷，取下层液备用。

2.3 SPE富集及浓缩

按照图2所示方法进行Sepline-S4方法编辑，加载并运行方法，Sepline-S4完成2.2中加标样品的SPE萃取。

样品收集到收集瓶中，在40℃，5psi条件下进行氮吹浓缩，当收集液浓缩到近干时，加入流动相定容至1mL，涡旋混匀，0.22μm滤膜过滤，待检测。

图2磺胺类药物固相萃取方法

2.4高效液相色谱检测条件

色谱柱：C18，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，或性能相当者；

流动相：0.3%乙酸水溶液：乙腈=7:3；

流速：1.0mL/min；

紫外检测波长：272nm；

柱温：35℃；

进样量：20μL。

3实验结果

3.1磺胺类药物标样液相色谱图

图3为100ng/mL的磺胺类药物标样的液相色谱图。

图3 100ng/mL的磺胺类药物标样液相色谱图

3.2空白样品色谱图

图4为空白样品的色谱图，在磺胺类药物的出峰时间处没有响应，说明该样品中有磺胺类药物未检出。

图4 空白样品色谱图

3.3加标样品色谱图

图5为加标样品的色谱图。

图5 加标样品色谱图

3.4加标回收率结果

表1为加标回收率结果，6个平行样的回收率为81.1%~83.9%，RSD为3.9%~9.2%。

表1加标回收率结果