Innopsys激光共聚焦微阵列生物芯片扫描仪扫描硫酸乙酰肝素多聚糖芯片，研究其在机体能量代谢和脂肪代谢过程中的调控作用

• 发表于《iScience》的研究《Charge Characteristics of Agouti-Related Protein Implicate Potent Involvement of Heparan Sulfate Proteoglycans in Metabolic Function》表明：刺鼠相关蛋白（AgRP）电荷特性，是硫酸乙酰肝素蛋白聚糖参与机体代谢调控的重要依据。

研究目的：内源性肾上腺皮质肽刺鼠关联蛋白（AgRP）在动物的觅食行为研究中十分广泛，但其对能量代谢的调节尚不清楚。

作者单位：美国-斯克利普斯研究所

样本：合成的多肽

芯片类型：多聚糖芯片

芯片扫描仪：Innopsys公司的激光共聚焦微阵列生物芯片扫描分析仪

进行AgRP相关的多肽合成和纯化。

氨基(-NH2)修饰的硫酸肝素多聚糖点印在NHS修饰的玻片上，AgRP（WT）和两种AgRP电荷变体肽（4Q；4K）在TMS缓冲液中稀释至50 mg/mL，与玻片进行孵育，随后加入络合的Rb抗人AgRP 抗体(10 mg/mL，一抗)和抗Rb IgG-Alexa 488 (5 mg/mL，荧光二抗)，最后使用法国Innopsys公司的激光共聚焦微阵列生物芯片扫描分析仪对多聚糖芯片进行荧光信号检测和定量分析。

结果显示：AgRP和电荷修饰AgRP变体与硫酸肝素多聚糖微阵列芯片相结合；AgRP的结合亲和力与巯基化状态和硫酸肝素寡糖的长度有关，6S和NS磺化对AgRP的结合有利，而3S磺化对AgRP的结合不利，AgRP-4K突变型的结合能力是野生型的50倍，如下图。

自由摄食量与对食物的操作性反应监测。

结果显示：AgRP-4K突变型小鼠对食物的摄取量和体重都有明显增加，如下图（A、E每日基本进食量；B、F未突变野生型；C、G、D、H突变型）。

实验动物综合监测，（气体浓度--氧气、二氧化碳测量、血流，体温，活动，进食，饮水等），结果如下图。

原文：

Chen et al.iScience 22, 557– 570 December 20, 2019 . https://doi.org/10.1016/ j.isci.2019.10.061