zenCELL owl 实时活细胞成像分析仪用于细胞划痕迁移实验助力酸性腹水抑制卵巢癌细胞迁移能力的研究

德国图宾根大学医院的Christoph Trautwein等人应用pH依赖性的探索方法和多种技术，如基于流式细胞术的细胞因子测定和基于核磁共振（NMR）的代谢组学分析，以更深入地表征腹水并确定腹水对卵巢癌的影响，研究成果以“Acidic ascites inhibits ovarian cancer cell proliferation and correlates with the metabolomic, lipidomic and inflammatory phenotype of human patients”为题发表在《Journal of Translational Medicine》杂志上。

研究者采集了10例癌症卵巢切除患者的恶性腹水标本，1H-NMR的代谢组学、基于血气分析仪的气流分析和流式细胞术，分别对腹水样品进行深入表型分析。通过调节卵巢癌细胞培养基的pH值，培养3D球体细胞和卵巢肿瘤细胞，用扫描电子显微镜（SEM）检查其形态学变化，并用MTT法、粘附法、流式细胞术和细胞划痕/迁移实验评估不同pH下卵巢肿瘤的代谢活性、粘附、抗凋亡和细胞迁移能力。同时在实验样品中加入10%的恶性腹水来评估腹水在不同pH下对肿瘤细胞的影响。

研究者采用德国innoME公司的zenCELL owl 实时活细胞成像分析仪进行细胞划痕迁移实验，测定OAW42卵巢癌细胞在体外不同的pH（6.0/6.5/7.0/7.5）条件下的迁移能力。

具体方法：将OAW42细胞接种在24孔板中培养过夜，然后用10μl枪头制造标准伤口。用PBS洗涤细胞两次，在一半的孔内加入10%的恶性腹水，并将细胞培养基滴定至不同的pH（6.0、6.5、7.0、7.5）。将培养板置于37°C的培养箱中，并通过zenCELL owl进行长时间实时活细胞成像监测。分别记录6、24和36小时的细胞迁移程度相对于初始划痕的伤口宽度，用%表示。

结果表明（图1），在酸性环境中，癌细胞的迁移能力因pH改变受到抑制，当10%恶性腹水与癌细胞共培养时，恶性腹水帮助卵巢癌细胞抵抗该抑制作用继续维持迁移能力。

图1 不同pH（6.0/6.5/7.0/7.5）条件下，卵巢癌细胞的迁移能力（%）左图：癌细胞单独培养时的迁移结果；右图培养基中10%恶性腹水与癌细胞共培养的迁移结果

本研究证明了呈碱性的恶性腹水促进卵巢癌进展，通过代谢组学和细胞因子研究进行深部腹水表型分析，可以对卵巢癌患者进行精细的分级，有助于更好的理解卵巢癌腹水病理学，继而确定卵巢癌患者的诊断和预后以及他们的治疗目标。

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https://doi.org/10.1186/s12967-022-03763-3

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