服用抗抑郁药却失眠、恶心？新一代药物正解决该问题

2025年10月，由蒋轶、徐华强、杨德华、王震所带领的研究团队在 Cell 上发表了题为 "Unveiling conformation-selective regulation of the norepinephrine transporter "的研究性论文聚焦NET的构象选择性调控机制，为新一代抗抑郁药物提供了结构指导框架，并筛选出适合的候选分子(该分子由TargetMol提供)。

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首先，通过冷冻电镜技术，分别解析了左米那普仑 - NET（NETⁿᵛᵐ）、凡诺西汀 - NET（NETⁿˣ）、维拉佐酮 - NET（NETᵛˡᶻ）三种复合物的高分辨率结构。该分辨率足以清晰呈现 NET 的跨膜螺旋（TM）排布、胞内外腔室轮廓，以及抑制剂与 NET 之间的原子级相互作用，为 S3 位点的定位提供了直接的结构依据。

接着，结合抑制剂的密度分布，在 NET 的内部腔室识别出一个全新的结合点 —— 即 S3 变构位点，区别于传统的 S1 位点。并通过计算机软件对图像进行运动校正、粒子筛选和 3D 重构，明确左米那普仑仅结合 S3 位点，凡诺西汀、维拉佐酮同时结合 S1 和 S3 位点。

NET与左米那普仑、维拉佐酮和凡诺西汀复合物的结构

研究人员以 “向内开放构象的 NET” 为模板，把 S3 位点作为 “靶点”；用计算机软件对包含 528,755 种化合物的数据库进行三轮筛选：先快速筛选（HTVS）保留 5 万个候选，再精准对接（SP）筛选至 1 万个，最后超高精度对接（XP）筛选出 109 种化合物。

接着，对 109 种化合物进行体外活性检测，筛选出NET抑制率≥50% 的 “种子分子”（如 F3288-0031，F6209-0468）；

以 “种子分子” 为模板，进一步搜索相似结构的化合物。最终筛选出 7 种高活性分子，其中 F3288-0031 的抑制率达 73.5%，抗抑郁效果最好。

筛选NET内向开放构象靶向的抗抑郁活性分子

• 体外功能验证 —— 测试候选分子的 “精准性”

转运抑制实验：检测不同浓度的候选分子对 NET 回收 “快乐递质” 的抑制效果，绘制剂量 - 效应曲线；

放射性配体结合实验：用放射性标记的药物，检测候选分子与 NET 的结合亲和力；

脱靶筛选：检测候选分子对 43 种神经 / 心血管相关靶点（如 SERT、DAT、α1AR）的作用。

结果：F3288-0031 能剂量依赖性抑制 NET，pIC₅₀值达 5.94；并且仅对 NET 和 SERT 有显著抑制，对其他靶点影响极小，靶点选择性高。

• 动物实验 —— 验证候选分子的抗抑郁效果与安全性

强迫游泳试验（FST）：给抑郁模型小鼠腹腔注射不同剂量的 F3288-0031、阳性药物（度洛西汀）或生理盐水，30 分钟后记录小鼠 6 分钟内的不动时间（不动时间越短，抗抑郁效果越强）；

自发运动活性（SLA）检测：给小鼠注射 F3288-0031 后，记录其 60 分钟内的移动距离，判断是否有镇静或兴奋副作用。

结果：F3288-0031 剂量依赖性缩短小鼠不动时间（30mg/kg、50mg/kg 组效果显著），抗抑郁活性媲美度洛西汀；同时小鼠的移动距离与生理盐水组无差异，证明无镇静、兴奋副作用。

• 药代动力学实验 —— 检测分子是否能成药

给小鼠腹腔注射 30mg/kg 的 F3288-0031，在不同时间点（0.083~24 小时）收集血浆和脑组织样品；用 LC-MS/MS 技术定量分析样品中药物的浓度，计算药代参数。实验结果证明F3288-0031 能有效穿透血脑屏障，注射后 0.5 小时，脑内浓度达 52.2μM，游离脑浓度 1.05μM，满足药效需求，具备成药潜力。

基于结构的NET构象选择性变构抑制剂发现

本研究揭示了 NET 构象选择性调控的全新机制，拓展了单胺转运体家族的研究认知；并建立了 “构象靶向 + 变构位点” 的药物筛选范式，为抑郁症、多动症等神经精神疾病提供了新的治疗方向，未来有望开发出更精准、副作用更小的靶向药物，改善患者治疗体验。

参考文献：Zhang H, Zhang T, Wang D, et al. Unveiling conformation-selective regulation of the norepinephrine transporter. Cell. 2025;188(24):6861-6872.e14. doi:10.1016/j.cell.2025.10.002