2026-02-03 15:29:00, 安捷伦科技 安捷伦科技(中国)有限公司
引言
氨基酸作为多肽与蛋白质的基本构成单元,在医药研发、食品质控、生物科研、饲料检测等领域应用广泛且关键。然而其兼具酸碱性基团、极性强、沸点高、紫外末端吸收弱的固有特性,使其成为常规液相/气相分析中的技术难点。实现氨基酸的精准定量、组成解析及杂质筛查,是现代实验室分析工作的核心目标。安捷伦深耕分析技术,推出氨基酸全方位分析解决方案,覆盖反相在线柱前衍生、HILIC、手性拆分、衍生化气相色谱等多元技术,全方位满足不同检测需求。本文将聚焦三大核心液相分析方案,为您深度剖析技术精髓。
反相在线柱前衍生方案
原理
利用 Agilent 1260/1290 自动进样器的程序进样功能,分别吸取样品和衍生试剂(OPA 和 FMOC),在定量环中进行自动化衍生操作,生成具有疏水性和紫外或荧光吸收的氨基酸衍生产物,再通过AdvanceBio AAA 色谱柱进行反相分离(中国药典 2025 四部通则 9120),常用 VWD,DAD 或 FLD 检测器。
特点和优势
在线自动衍生,减少手动操作误差,重现性好
操作简便,可实现批量分析,提高分析效率
良好的分离度,峰形和高灵敏度,方法耐用
从标准品,衍生试剂,到色谱柱和应用支持的完善单一供应商解决方案
应用
广泛应用于氨基酸原料、复方氨基酸制剂、生物样品、多肽或蛋白质水解产物、细胞培养基等样品中的氨基酸组成和/或含量分析。符合中国药典 2025 四部 9120(柱前 OPA 和 FMOC 衍生氨基酸测定法)。
典型谱图
图 1. 使用氨基酸分析方法和具有不同内径的 Agilent AdvanceBio AAA 色谱柱分离 AA 标准品
色谱柱和试剂盒配置
色谱柱和试剂盒 | 规格 | 货号 |
AdvanceBio AAA分析柱 | 4.6 x 100mm, 2.7μm | 655050-802 |
AdvanceBio AAA 保护柱 | 4.6 x 5mm, 2.7μm,3/包 | 820750-931 |
AdvanceBio AAA 分析柱 | 3.0 x 100mm, 2.7μm | 695975-322 |
AdvanceBio AAA 保护柱 | 3.0 x 5mm, 2.7μm,3/包 | 823750-946 |
标准品和 衍生试剂盒 | 包含氨基酸标准品,OPA 和 FMOC 衍生试剂盒 | 5190-9426 |
直接进样分析 - HILIC 方案
原理
氨基酸化合物极性强,在 HILIC 模式下有良好的保留。两性离子型的 Poroshell HILIC-Z 色谱柱对氨基酸有良好分离和峰形。氨基柱也可以用于氨基酸分析,属于 HILIC 分离模式。
检测器
MSD 、ELSD、 VWD、 DAD 等
特点和优势
无需衍生操作,直接进样进行分析;具有与传统反相液相色谱类似的工作流程;尤其使用 HILIC-Z 色谱柱时,兼容所有的检测器。
应用
氨基酸含量和有关物质分析、复杂基质中的氨基酸(如门冬氨酸鸟氨酸)分析(如细胞培养或发酵过程监测,白酒,饲料,植物基质中的氨基酸检测)。
典型谱图
色谱柱推荐
色谱柱 | 应用 | 货号 |
Poroshell HILIC-Z,4.6 x 250 mm, 4 μm | HPLC 通用 | 680970-924 |
Poroshell HILIC-Z,4.6 x 150 mm, 2.7 μm | HPLC 快速分析 | 683975-924 |
Poroshell HILIC-Z,2.1 x 100 mm, 2.7 μm | UHPLC或LCMS | 685775-924 |
DL 氨基酸手性分析方案
原理
使用糖肽类抗生素(替考拉宁或万古霉素)键合硅胶进行 DL 氨基酸分离
检测器
ELSD、 MSD、 CAD、 VWD、 DAD 等
特点和优势
方法简单,对保护氨基酸也有良好分离能力
应用
氨基酸和保护氨基酸的 DL 杂质分析
典型谱图
色谱柱推荐
色谱柱和试剂盒 | 规格 | 货号 |
Poroshell Chiral-T4.6 x 100 mm, 2.7 μm | DL 氨基酸(或保护氨基酸)分析首选 | 685975-603 |
Poroshell Chiral-V4.6 x 100 mm, 2.7 μm | DL 保 护 氨 基 酸 分 析( 如 FMOC 或 BOC 保 护 基) 补充手性柱,反相模式 | 685975-604 |
Poroshel Chiral T 和 V 柱也适合做多肽(GLP-1)的 DL 消旋体分析。
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