【ADC 研发加速器】抗体结合、内化、降解到药效评价，一篇全搞定

2026-01-26 10:11:18, 赛默飞生命科学赛默飞世尔科技生命科学产品

抗体偶联药物（Antibody–Drug Conjugates，ADC）凭借“抗体精准识别 + 高效细胞毒药物”双重优势，被誉为肿瘤治疗领域的 “生物导弹”。它既能像抗体药物一样精准锁定肿瘤细胞，又能将强效 payload 定向递送至细胞内部释放，实现比传统化疗更高效、更安全的靶向杀伤。随着技术不断成熟，ADC 正成为全球生物医药创新最活跃的赛道之一。

但 ADC 的研发并不轻松。从抗体筛选、内化动力学，到溶酶体降解、payload 释放，再到细胞毒性与作用机制解析，每一个环节都涉及复杂的生物过程，也面临着实际研发中常见的挑战：

抗体库庞大、筛选周期长：如何快速找到真正能结合、能内化的抗体？
内化及降解过程难实时监测：抗体进入细胞后是否顺利到达溶酶体？Payload 是否真正释放？
体外药效机制复杂、多维度评价困难：ADC 到底是抑制增殖、诱导凋亡，还是导致细胞周期阻滞？
标记一致性难控制：如何实现可重复、位点特异的 ADC 构建？

这些痛点，不仅影响研发效率，也直接决定 ADC 项目的成败。

为了帮助研发人员跑通 ADC 的全流程，赛默飞专门开发了全面的工具体系，将 ADC 研发中的关键实验步骤拆解为可量化、可监测、可优化的模块，帮助你更高效地完成从抗体筛选到机制解析的研发闭环。

表1. ADC 研发五大关键环节总览

Step 1：抗体结合筛选

图1. Her-2 阳性 SKBR3 细胞用 Zenon Alexa Fluor Plus 标记试剂标记（货号举例：Z25619）的曲妥珠单抗在 37℃和 5% CO2 下处理 30 分钟。用 1x PBS 清洗细胞 3 次，然后使用 Thermo Scientific™ CellInsight™ CX7 Pro 高内涵成像平台进行成像。阴性对照：将细胞与不含曲妥珠单抗的 Zenon 试剂一起孵育。

Step 2：ADC 内化检测

图2. 用 Zenon pHrodo Deep Red （货号Z25618）标记的曲妥珠单抗或 Zenon pHrodo Deep Red （货号Z25622）标记的抗转铁蛋白受体处理SKBR3 细胞 16 小时，以使单抗或受体完全内化。在成像之前，用 50 nM Invitrogen LysoTracker Red 处理细胞 1 小时。使用 RFP 和 Cy5 滤光片在 Invitrogen EVOS M7000 成像系统上成像。

Step 3：溶酶体降解监测（LysoLight）

图3. LysoLight Deep Red （货号L36001）或 LysoLight green （货号L36005）与西妥昔单抗（或同种型对照）结合，并与 EGFR+ 人肺肿瘤球状体（HuLu051421）一起孵育 16 小时。接下来用 Hoechst 复染肿瘤球状体细胞，并在共聚焦显微镜上成像。

Step 4：细胞健康检测（从药效到机制）

Step 5：ADC 位点特异性标记（SiteClick 技术）

图4.使用 SiteClick Duet 抗体修饰试剂盒，以 Invitrogen™ Alexa Fluor™ 488 染料标记CD28.2单克隆抗体。采用 Thermo Scientific™ Orbitrap Exploris™ 240 质谱仪和 Vanquish™ Horizon UPLC 系统对 SiteClick 叠氮修饰抗体和 SiteClick 染料修饰抗体进行天然完整蛋白质量分析。使用 Thermo Scientific™ BioPharma Finder™ 软件对数据进行解卷积。SiteClick Duet 偶联产物的DOL为 2，且是唯一偶联产物。

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