基于SCIEX本土化Triple Quad™ 7500+系统实现高覆盖靶向脂质组学分析

2025-11-03 09:57:42, SCIEX SCIEX


SCIEX本土化产品Triple Quad 7500+ 

在成功完成Triple Quad™ 4500/5500+/6500+及QTRAP® 4500/5500+/6500+系列产品的本土化生产后,SCIEX旗舰型三重四极杆质谱系统7500+ Triple Quad™与7500+ QTRAP®已正式在中国苏州实现本土化制造。


这标志着SCIEX三重四极杆质谱平台已实现全系列国产化布局,覆盖从常规检测到高端科研的多层次需求。


背景


脂质作为生物膜的核心组成成分、机体能量储存的关键载体及细胞信号传导的重要分子,其组学分析在疾病机制解析、药物作用靶点筛选、临床诊断标志物挖掘及食品营养评估中具有不可替代的核心价值。然而脂质分析是一项复杂且极具挑战性的分析任务,主要原因包括:脂质种类繁多,目前已鉴定出的超过15万种;生物样本中不同脂质分子的浓度差异很大,动态范围可跨越10至12个数量级;脂质结构复杂多样,且缺乏完整的标准品资源,进一步增加了准确鉴定的难度。质谱技术凭借其高灵敏度、优异的特异性及较宽的定量范围,已成为脂质组学研究的主流工具。


SCIEX推出的本土化三重四极杆质谱7500+系统,显著提升了离子传输效率与数据采集速度,在保持高灵敏度和快速正负极性切换能力的同时,进一步拓宽了定量线性范围。采集速度的提升不仅增加了色谱峰采集点数,也提高定量准确性与重复性。基于SCIEX本土化Triple Quad™ 7500+质谱系统,我们建立了一个可覆盖约2500种脂质分子的高通量靶向脂质组学分析方法。


优势点


  1. 该方法可覆盖2500多种脂质分子,包括甘油酯、甘油磷脂、鞘脂、糖脂、脂肪酸等多种类型脂质。

  2. SCIEX本土化Triple Quad™ 7500+系统同时兼有超高灵敏度、超高扫描速度、快速的正负极性切换、以及较宽动态范围的特点,在提高方法通量的同时,又能保证数据的质量。


图1. 本土化产品SCIEX Triple Quad™ 7500+系统


实验条件


1. 液相方法

1.1 C18液相方法

  • 色谱柱:Phenomenex kinetex C18 (100*2.1 mm, 2.6 um)

  • 流动相A:水:乙腈:甲醇 (1:1:1, 7 mM乙酸铵)

  • 流动相B:异丙醇(7 mM乙酸铵)

  • 流速:0.35 mL/min

  • 柱温:45 ℃

  • 梯度洗脱:


1.2 HILIC液相方法

  • 色谱柱:Phenomenex Luna NH2 (100*2 mm, 3 um)

  • 流动相A:二氯甲烷/乙腈 (7:93, 2 mM乙酸铵)

  • 流动相B:水/乙腈(1:1, 2 mM乙酸铵)(PH=8.2)

  • 流速:0.4 mL/min

  • 柱温:40 ℃

  • 梯度洗脱:


  1. 质谱方法

  • 数据采集模式:Scheduled MRM

  • 离子源:ESI源正模式/负模式

图2. 方法覆盖脂质种类


实验结果


  1. 化合物峰型好、灵敏度高、重现性好

图3中展示了4种不同脂类化合物的提取离子流色谱图,并对这4个化合物连续进样6次峰面积CV值进行计算,结果可以看到CV均小于8%,说明方法重现性较好。


图3. 4种不同脂类化合物的提取离子流色谱图


2. 数据分析

本实验共检测11个动物血浆样本用于差异性分析,其中6个为给药组样本,另外5个为模型组样本。利用建立的高覆盖靶向方法对这批样本中脂质化合物进行了分析。为了找出变化差异明显的脂质分子,进一步进行了统计分析,通过设置p-value<0.05、FC≥1.2或≤1/1.5和VIP>1为筛选条件,共找到98个含量有明显差异的脂质分子。从热图(图4)也可以发现,在模型组与给药组之间部分脂质分子含量有显著差异,在Top 25的化合物中可以明显观察到相比于模型组,在给药组中,大部分的甘油酯类有明显的上调趋势。


图4. 两组血浆样本的热图(Top 25)

(其中M为模型组,Y为给药组)


总结


综上,基于SCIEX本土化Triple Quad™ 7500+质谱系统开发的高覆盖靶向脂质组学分析方法,可有效应对脂质分析的技术挑战,为脂质组学领域的靶向研究提供了高效、稳定、可靠的分析手段。


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