同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术由AB SCIEX于2004年开发并推出,是目前差异蛋白质定量分析方法通量zei高,系统误差zei小,功能zei强大的分析方法之一。 可以同时比较2-8组样品的蛋白质表达差异。目前iTRAQ做到8个样品(8plex)同时标记分析,TMT同时做到10个样品(10plex) .
实验流程
技术平台
Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion™ 和Tribrid™
技术优势
体外标记技术,适用于各种生物材料;
灵敏度高,检测限低,可检测出低丰度蛋白;
分离能力强,分析范围广,iTRAQ可以对任何类型的蛋白质进行分离鉴定,包括高分子量蛋白质、酸性蛋白和碱性蛋白,膜蛋白和不溶性蛋白;
高通量:同时对8个样本进行分析,提高了实验通量,可同时对多个时间点或不同处理的蛋白质进行分析;
结果可靠:定性与定量分析结果更加可靠;
自动化程度高:液相与质谱连用,自动化操作,分析速度快,分离效果好。
应用领域
机理和调控机制研究、动态过程中机制研究
疾病标志物的筛选,用药及预后标志物筛选
参考文献
[1] Poljak, A., et al. (2014) Quantitative proteomics of delirium cerebrospinal fluid. Translational psychiatry 4, e477
[2] Beck, F., et al. (2014) Time-resolved characterization of cAMP/PKA-dependent signaling reveals that platelet inhibition is a concerted process involving multiple signaling pathways. Blood 123, e1-e10
相对定量蛋白质组学(iTRAQ),
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