一、客户提供信息:
◆ 客户具体需要的服务项目
◆ 所要表达的外源基因的名称,序列,客户如有现成的DNA模板可提供并提供电泳图片,图谱等相关信息
◆ 所要选择的慢病毒载体(我们现在可供选择具有GFP,lacZ报告基因及不带报告基因的慢病毒载体)
◆ 所需要表达的外源基因是否要带有融合标签,如果需要请选择需要的标签,并选择加入标签的位置
◆ 是否需要检测外源基因的表达,如需要请提供相应的抗体
◆ 所需要的病毒滴度
◆ 如需要筛选稳定细胞株的客户需选择符合自己需要的细胞株(可以自行提供)
1.1慢病毒包装服务特点:
1.1.1直接包装成为假病毒颗粒,对分裂和非分裂细胞均有感染作用,适合RNAi研究和体内实验中难于转染的细胞 (比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。
1.1.2可以通过简单方式,在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。
1.1.3可用于基因敲除、基因治疗和转基因动物研究。
1.1.4无需任何转染试剂,操作简便。
1.1.5可以根据客户需要制备多种标记。
1.2原理:
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,Lentivirus-siRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。
1.3慢病毒包装简要流程:
1.3.1含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。
1.3.2慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞。
1.3.3培养48hrs - 72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液。
1.3.4病毒的纯化和浓缩。
1.3.5分装、- 80 oC保存。
1.3.6滴度测定。
1.4本公司提供的zei终产品包括:
1.4.1重组后的慢病毒载体质粒以及测序图谱。
1.4.2产品无菌检测结果。
1.4.3慢病毒储液及相应的病毒滴度。
1.5我们保证:
1.5.1 制备的病毒颗粒携带片段的正确性
1.5.2 病毒颗粒的总数和病毒滴度:如无特殊要求我们提供1mL滴度为1×107 - 1×108 vp/ mL的病毒储液。
过表达载体和shRNA的慢病毒包装服务,
过表达载体和shRNA的慢病毒包装服务信息由百奥迈科生物技术有限公司为您提供,如您想了解更多关于过表达载体和shRNA的慢病毒包装服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。