腺病毒包装服务包括病毒载体构建和重组病毒包装。
一、客户提供信息:
◆ 客户具体需要的服务项目
◆ 所要表达的外源基因的名称,序列,客户如有现成的DNA模板可提供并提供电泳图片,图谱等相关信息
◆ 所要选择的穿梭载体
◆ 所需要表达的外源基因是否要带有融合标签,如果需要请选择需要的标签,并选择加入标签的位置
◆ 是否需要检测外源基因的表达,如需要请提供相应的抗体
◆ 所需要的病毒滴度及总量
◆ 病毒是否需要纯化
1.1 腺病毒包装服务特点:
1.1.1几乎可以感染所有类型的细胞。
1.1.2可以获得复制缺陷型 (E1和E3缺失) 的腺病毒。
1.1.3病毒滴度高,产生病毒经过浓缩后可以达到1012 PFU/mL,能有效的进行增殖。
1.1.4腺病毒载体感染宿主的范围比较广,制备容易,操作简单.
1.1.5感染细胞时,不整合到染色体中,不存在激活致癌基因或插入突变等危险,生物安全性高。
1.2原理:
腺病毒 (Adenovirus,Ad) 是一种无包膜的线状双链DNA病毒,其复制不依赖于宿主细胞的分裂。有近50个血清型,大多数Ad载体都是基于血清型2和5,通过转基因的方式取代E1和E3基因,降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制,因此是一种适用于治疗的高效控制系统。
1.3腺病毒包装简要流程 (以Invitrogen包装系统为例)
1.3.1含有目的基因的腺病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。
1.3.2采用PacI消化纯化的质粒。
1.3.3消化好的腺病毒表达载体转染293A细胞,收获细胞以制备病毒粗提液。
1.3.4将病毒粗提液感染293A细胞以扩增病毒。
1.3.5分装,- 80 oC保存。
1.3.6滴度测定。
1.4本公司提供的zei终产品包括:
1.4.1重组后的腺病毒载体质粒以及测序图谱。
1.4.2产品无菌检测结果。
1.4.3腺病毒储液及相应的病毒滴度。
1.5我们保证:
1.5.1 制备的病毒颗粒携带片段的正确性2) 病毒颗粒的总数和病毒滴度:如无特殊要求1.5.2我们提供1mL滴度为1×1010 - 1×1012个病毒基因组 / mL的病毒储液。
腺病毒包装服务,
腺病毒包装服务信息由百奥迈科生物技术有限公司为您提供,如您想了解更多关于腺病毒包装服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。