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荧光定量PCR简介: 实时荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zei后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。 在常规PCR基础上添加了荧光染料或荧光探针。荧光染料能特异性掺入DNA双链,发出荧光信号,而不掺入双链中的染料分子不发出荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物增加完全。 应用范围: ☆ 医学及临床 临床检测: 疾病的临床早期诊断:医院、血液中心、防疫系统:各种疾病的诊断和确诊 病原体含量分析:患者用药后病情分析;感染性疾病治疗方案确定; 病毒性疾病中病毒的耐药性变异株的测定,为疾病治疗进行指导 HLA分型:取代传统电泳方法 遗传病诊断: 等位基因检测; 基因表达异常所致遗传病检测; 多基因遗传病的突变检测 肿瘤诊断: 肿瘤相关基因表达的检测:包括癌基因抗癌基因、肿瘤转移基因及转移抑制基因 肿瘤标志物如癌胚抗原、同功酶、抗体、激素、细胞因子、受体等 肿瘤耐药基因(MDR) ☆ 科学研究: 分子生物学相关: 细胞mRNA含量变化 比较染病组织与正常组织中各种mRNA含量差异 基因重组拷贝研究 DNA或RNA相关实验 植物学相关 转基因植物中基因拷贝数与性状的关系 监测转基因植物中基因拷贝数的变化 转基因植株早期的筛选 转基因成份的转移 植物病理相关实验 动植物疫病监测、诊断、控制 疾病的发病监控研究 建立病原体病分子诊断标准 新的愈后指标的研究 ELISA方法的相关实验 药学相关 新药物开发 药物疗效研究 试剂产品研究和研发 FUNGLYN FTC-3000型荧光定量PCR仪的特点: *激发光源采用卤素灯或LED,采取光纤导入的方式,zei大限度避免了光信号的衰减,解决了光强均一性问题的同时, 保证了卤素灯的使用寿命。 使之延长到大约为3000个小时; *96个样品管信号分别输出,避免光信号之间的干扰,增加了检测灵敏度; *在1秒内,即可同时完成96个样品的荧光信号的采集和分析工作; *12列梯度温区,6点温度模块独立控温,可以同时设置6个不同反应温度,实现一机多用,同时可以进行高达6个不同PCR扩增反应; *高分辨熔解曲线分析功能,有效区分单个碱基的差异,利用SYBR GREEN 1可进行等位基因(SNP)分析,基因突变分析等。节省探针成本; *内嵌式电脑设计,windows XP系统操作方便,拥有中英文操作界面,触摸屏,也可连接外置鼠标键盘,能满足不同使用者的各种需求,软件灵活,可升级。 详细参数: *工作条件 工作电压:AC220V,50Hz 嵌入式计算机:XP/10寸LCD显示屏 技术性能指标 激发光源:卤钨灯,激发波长400-750nm 检测系统:CCD 检测波长350-700nm 可应用技术方法:Taqman, Molecular Beacons, Sybr Green I, Scorpions, Amplifluor,FRET等 可用荧光染料:FAM/SYBR Green I, TET, HEX/ JOE/ VIC, Cy3, TAMRA, ROX/ TEXAS RED, Cy5 多色检测:五通道,可同时检测五色荧光 滤 镜:2套可自由搭配的五通道滤光片系统(激发光、发射光各五片) 滤光片组标准配置:FAM/SYBR Green I,HEX/JOE/VIC,ROX/TEXAS RED,Cy5,Cy3 样品容量:96孔板,8联管或单管 温控方式:Peltier热循环器 梯 度:12 列温度梯度 6点独立控温:6 个独立温度区域 升温速度:4.0℃/s 降温速度:3.5℃/s 温度均一性:±0.20℃ 温度精确性:±0.10℃ 温度范围:4-99℃ 线性范围:10个数量级 检测分辨度:单拷贝基因检测,区别5000个拷贝与10000个拷贝样品的可信度为99.7% 反应时间:标准的40个循环2步法定量PCR 反应在90分钟内完成;利用FullVelocity™ 试剂在52分钟内完成。96孔扫描一遍1s 快速反应:与FullVelocity Kit配套使用,40个循环约50min 尺 寸:32cm x 45cm x 28cm (深) X (宽) X (高) 重 量:18公斤 分析软件: zei多可同时可进行5通道实验 • 支持FRET实验(两个滤镜轮分别单独控制) • 简便的板设计和染料选择 • 一块板上可以进行多种实验;能显示原始荧光数据。 • 选择默认设置,一步就可以开始PCR反应 • 具有绝对定量分析、相对定量、等位基因分析、SNP点突变分析等功能 • PCR运行过程中可以实时检测PCR反应进程,并可以随时分析数据
荧光定量PCR仪,FTC-3000
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