Brefeldin A中文名布雷非德菌素 A-MCE

　　Brefeldin A 布雷非德菌素 A (BFA) 是一种内酯抗生素，是蛋白质运输的特定抑制剂。Brefeldin A 布雷非德菌素 A 阻断分泌蛋白和膜蛋白从内质网向高尔基体的转运。Brefeldin A 布雷非德菌素 A 也是一种自噬 (autophagy) 和 mitophagy 抑制剂。Brefeldin A 布雷非德菌素 A 可抑制 HSV-1病毒，并具有抗癌活性。

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　　生物活性

　　体外研究

　　Brefeldin A 布雷非德菌素 A (BFA) :www.activeinhibitor.com/yzj/2385.html处理 15 小时或 40 小时，会导致内质网 (ER) 显著肿胀，并将其定位转移到正常大鼠肾 (NRK) 细胞的外围。延长 Brefeldin A 布雷非德菌素 A 处理会导致 MT 和肌动蛋白细胞骨架显著破坏。BARS 的 ADP-核糖基化是由 Brefeldin A 布雷非德菌素 A 和 ADPR 之间形成结合物介导的。当与来自 BFA 处理的 CD38+ HeLa 细胞[3]的培养基一起孵育时，BARS 显示 BAC 结合。Brefeldin A 布雷非德菌素 A 在 MDA-MB-231 乳腺癌细胞中诱导不依赖锚定的细胞死亡，抑制 3D 和 2D 培养物中 MDA-MB-231 集落的形成，并抑制 MDA-MB 的迁移和 MMP 9 (基质金属肽酶 9) 活性-231。

　　MCE 未独立验证这些方法的准确性，仅供参考。

　　溶解性数据

　　动物实验：

　　请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

　　以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

　　——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；

　　以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

　　方案 一

　　请依序添加每种溶剂： 10% DMSO  →  40% PEG300  →  5% Tween-80  →  45% Saline

　　Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (8.92 mM); 澄清溶液

　　此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。

　　生理盐水的配制：将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。

　　方案 二

　　请依序添加每种溶剂： 10% DMSO  →  90% (20% SBE-β-CD in Saline)

　　Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (8.92 mM); 澄清溶液

　　此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。

　　2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。

　　方案 三

　　请依序添加每种溶剂： 10% DMSO  →  90% Corn Oil

　　Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (8.92 mM); 澄清溶液

　　此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。

　　方案 四

　　请依序添加每种溶剂： 10% EtOH  →  40% PEG300  →  5% Tween-80  →  45% Saline

　　Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (8.92 mM); 澄清溶液

　　此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。

　　生理盐水的配制：将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。

　　方案 五

　　请依序添加每种溶剂： 10% EtOH  →  90% (20% SBE-β-CD in Saline)

　　Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (8.92 mM); 澄清溶液

　　此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。

　　2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。

　　方案 六

　　请依序添加每种溶剂： 10% EtOH  →  90% Corn Oil

　　Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (8.92 mM); 澄清溶液

　　此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 900 μL 玉米油中，混合均匀。

　　实验参考方法

　　细胞实验

　　将细胞接种于盖玻片上，用含 3% 多聚甲醛的 PBS 固定（室温 10 分钟），随后用 PBS 洗涤。

　　用含 0.01% Triton X-100 的 PBS 在室温下对细胞进行透化处理，时长 7 分钟。

　　洗涤盖玻片（PBS/0.2% Tween 洗涤 3 次），先后用 PBS/0.4% 鱼皮明胶 / 0.2% Tween 孵育 5 分钟、PBS/2.5% 山羊血清 / 0.2% Tween 孵育 5 分钟进行封闭。

　　封闭完成后，加入一抗，37℃孵育 45 分钟，随后用 PBS/0.2% Tween 洗涤 5 次，每次 5 分钟。

　　加入二抗，37℃孵育 30 分钟，之后按上述相同方法洗涤细胞。

　　将盖玻片以 9:1 的甘油 / PBS 混合液（含 0.1% 邻苯二胺）作为封片剂封片。

　　MCE 未对这些方法的准确性进行独立验证，仅供参考

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