固定底物技术酶底物法原理: 酶底物法原理采用总大肠菌群产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-B-D-galactopyranoside)使培养液呈黄色;大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解荧光色源底物MUG(4-methyl-umbeliferyl-β-glucuronide )使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、微大肠菌群(耐热大肠菌群)及大肠埃希氏菌,Colitech酶底物法试剂是采用GB/T5750.12-2006《生活饮用水标准检测方法》中固定底物技术(Defined SubstrateTechnology,DST)的Minimal Medium ONPG-MUG (MMO-MUG)和环境标准HJ 1001-2018的培养基。当Colitech酶底物法检测试剂加入含有总大肠菌群细菌组的水样,目标细菌在含有固定底物Minimal Medium ONPG-MUG的培养基中繁殖,大肠菌群细菌组产生的特异性生物酶β-半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培养基中的固定色原底物ONPG,使培养基呈现黄色;同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性β-葡糖苷酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的固定荧光底物MUG,产生特征性蓝色荧光。同样原理,耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium 0NPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养基呈现黄色。因而可以定性检测水中总大肠菌群、耐热(粪)大肠菌群和大肠埃希氏菌。当水样中少数非目标细菌的生物酶试图和ONPG或MUG反应,干扰检测结果时,colitech培养基中特殊配方的基质会抑制其反应进程,控制假性的产生;同时,这些特殊配方基质可以有效促使目标细菌的生物酶和固定底物反应,所以假阴性发生率比传统方法更低。Colitech酶底物法试剂和51或97孔定量检测盘联合使用,可以定量检测100毫升水样中目标细菌,51孔定量检测盘检测范围0-200MPN,97孔定量检测盘检测范围0-2419MPN,而不需稀释。