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OWLS是一种新型的非标记光学检测方法,可实现生物分子相互作用仪及免疫分析仪等功能。它通过检测波导附近的有效折射率的变化进行传感,无需进行放射性、荧光、或其他标记方法。
技术特征 光波导模式谱(OWLS) 仪器型号 OWLS 120 生产公司 MicroVacuum(匈牙利) 中国代理商 北京创新思成科技有限公司 原理 光栅将氦-氖激光以一特定的共振角度耦合进入波导层,耦合角度会敏感地随着吸附分子种类及芯片表面覆盖介质的折射率变化而变化。当精确地测量到耦合角度时,可极其灵敏的检测出被吸附物质的量。 主要作用 进行生物分子相互作用分析 *应用领域 更广泛:DNA-蛋白质类物质的相互作用、磷脂双分子层(细胞膜)的行为、细胞-矩阵的交互反应、细胞表面粘附分子的成份特征、细胞分析、毒理学研究、环境及环境污染监测、生物材料的安全性测试、生物分子相互作用、神经生物学、免疫学、药物筛选、兽药残留、临床诊断、食物检测及环境监控、膜生物学等领域。 技术特点 成熟,已有多篇论文发表 检测方法 检测反射光强度和检测相位 仪器体积 0.080m3(535×500×300mm) 传感器* 氨基修饰波导传感器表面,可使传感器表面再生; 抗体共价结合在传感器表面,可使测量再生循环,检测并延长传感器寿命,稳定、优化传感器。 激光器 稳功率 He-Ne 激光器 入射光 入射光包含 TM 和 TE 两种模式 系统加样元件 可实现无气泡、样品池的液体流速可控的目的,可选20µl~500µl的加样环用于控制加样体积 温控部件* 可加热和冷却系统感应架,无震动;温度范围大(20~80℃),控温稳定,误差小于±0.1℃ 表面备用配件 与各种质谱完美匹配,目前zei新的生物分子作用分析与质谱分析结合的OWLS-MS技术,能快速有效地鉴定未知蛋白 *可选配件 电-化学OWLS系统:ITO覆膜的OW2400传感器和EC样品池,可在电场中检测表面吸附。荧光-OWLS测量系统:特制荧光样品池可将荧光标记和OWLS法结合,荧光-生物感应软件模块用于数据分析。 *自动折射计 为缓冲液特别设计的,可在线和离线测量覆盖介质的折射率,增强计算准确度。 *稳压/稳流装置 可运行标准技术,如循环伏安法、计时电流法、方波法及微分脉冲伏安法。 芯片 OW2400,OW2400c,OW2400-EC 软件
BioSense是与MS Windows兼容的应用软件,可灵活控制OWLS120设备的测量、数据的获取、分析和存储。(1)测量:可实时高效地监控、跟踪、定量化学和生物化学反应或吸附,快速而简便地进行测量和分析。(2)对设备全程控制:步进电机控制,对光电流、温度测量的自动控制,定时,角度参考点的自动校准等。(3)可视化:嵌入图表工具使测量过程持续实时可视化。(4)分析:提供传感芯片光学参数的评估,包括:光导膜和吸附物质的折射率、厚度,覆盖介质的折射率,芯片参数的自我校准,每cm2吸附的质量,结合动力学信息。 (5)数据导出:测量结果可转换为常用制表和电子制表格式(Excel, Origin,等),密码保护使用者的文件。 (6)多人使用环境:密码保护使用者的文件、个性化登录和测量的条件设置。(7)存储:全面的数据库结构为多层文件夹和文档提供密码保护。每个测量可按项目和实验归类,关键词和文档区可填入测量条件的细节描述,所有与测量、传感器、用户相关的数据均可作为研究条件出现在数据库中。
样品 要求 样品类型 液体,包括小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核甘酸、寡聚糖、类脂、噬菌体、病毒和细胞、奶粉、谷物、蜂蜜、尿样、肉类等 样品特点 水溶或非水溶样品:能检测有色或混浊甚至不透明样品中进行 可测分子量范围* >100Da 预处理与否 大多数情况下,不需对样品进行预处理,简化了样品制备 需标记与否 无需标记样品,保持了分子活性与天然性 进样控制 半自动 样品容量 进样体积 10~750ul *样品需要量 样品需要量极少,成本更低,一般一个表面仅需约1ug 蛋白配体或1pg微量样品,可从粗样品如体液或细胞液中直接检测活性蛋白(与实验方法有关) *试剂消耗 微量,如Buffer:50ml/24h 检测过程中的特点及参数 速度(分析时间) 1~15分钟/样品 *折光率范围 1.30~1.80 在线去背景对照 手动 温度 20~80℃ 基线噪音 <10-7(折射率) 基线漂移 <10-8/min 反应干扰 对复合物的定量测定不干扰反应的平衡 操作特点 操作简便,直接检测与分析复杂混合物 检测结果特点 *浓度分析 10-7ng/ml *重复性 单个点;在同一芯片上检测,且检测条件可控,重复性好 能否实时检测 能实时检测,动态地监测生物分子相互作用的全过程 能否跟踪监控 能跟踪监控固定配体的稳定性 *灵敏度 高灵敏度,适合检测痕量样品和含量特别低的成分 可靠性 为药物研发和制药企业提供全面的技术控制和结果论证 分析数据 提供多种算法(二分法、微积分法等)、高质量 检测 极 限 *HSP-70 蛋白 1pg/ml(用70 KDa热休克蛋白HSP70的单克隆抗体测得) *TNFa 从数量级达100pg/ml的部分纯化样品中检测出TNFa。 *E.Coli 3×103CFU/ml(用埃希氏菌属E.Coli的单克隆抗体测得)。 *二硝基苯胺除草剂氟乐灵 可增强对10ug/ml抗原和1:2000抗血清稀释液的感应性,提供2×10-7~3×10-5ng/ml范围内氟乐灵的标准曲线。 *小结 pg级,适合检测痕量样品和含量特别低的成分
1.样品无需任何标记,对待测样品无损伤; 2.检测速度快(1—15min/样品); 3.灵敏度高达pg级; 4.样品用量少; 5.实时监测生物分子相互作用。
生物传感器,OWLS 120
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