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实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特性,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响。双报告基因载体系统以Luc作为启动子报告基因,以Rluc作为信号标准化的内参。实验流程:客户提供:客户可以提供构建好的启动子-luc质粒、转录因子表达载体、以及内参质粒pRL-TK,如无,需提供启动子和转录因子的序列信息,我方可以提供载体。拓普生物提供:完整的实验操作规程、实验报告(包括试剂名称、仪器型号、操作步骤和数据分析等)、原始实验数据。实验周期:4-5周案例分享:
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