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腺病毒包装
腺病毒是一种没有包膜的颗粒,其中的DNA以线性双链的形式存在。由于其具有宿主范围广、可感染分裂和非分裂细胞、高滴度制备、外源基因装载容量大等优点,已被广泛地应用于基础研究和临床试验中,并且腺病毒载体已成为世界上最常用的基因治疗载体之一。 科维创生物采用的AdMax^TM重组腺病毒系统是将携带外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带腺病毒基因组的包装质粒共转染包装细胞,借助Cre/loxP系统的作用重组产生腺病毒。该系统既克服了传统共转染系统重组效率低的缺点,也避免了细菌重组中的种种不确定性,实现了快速高效的腺病毒包装。 科维创生物提供Ad5和Ad5/F35两种血清型腺病毒,凭借丰富的病毒基因载体研发经验,科维创生物在AdMax^TM包装系统基础上建立了Ad5/F35Max^TM载体包装系统。Ad5/F35是Ad5的病毒纤突(Fiber)被改造成35型腺病毒纤突的嵌合型腺病毒载体。其基因组中仅有fiber是嵌合的,其它的基因仍旧保留了Ad5载体的特征。其原理与AdMax系统相似。Ad5/F35腺病毒骨架质粒可以与带有loxP位点的穿梭质粒配合,通过Cre/loxP,使转染进包装细胞的穿梭质粒和骨架质粒发生定点重组,产生带有外源基因的重组腺病毒(Ad5/F35)。 科维创生物提供的Ad5和Ad5/F35两种重组腺病毒均为复制缺陷型病毒,即病毒感染目的细胞后不会再感染其他细胞,也不会利用宿主细胞产生新的病毒颗粒,安全性能良好。 Ad5MaxTM腺病毒特点 1、复制缺陷型腺病毒颗粒,对分裂期和非分裂期细胞均有感染作用;2、无需任何转染试剂,操作简单;3、实验简便,时间短;4、适用于在难以转染的细胞中进行RNA干扰、过表达特定基因或过表达特定microRNA研究和In vivo 实验;5、不适用于感染腺病毒以后细胞发生死亡和分化的敏感细胞和需要长期稳定表达目的基因的实验。 Ad5/F35MaxTM腺病毒特点 除了保留常规Ad5Max系统出毒快、稳定性好、产率高等优点,Ad5/F35还具有其独特优势: 1、感染细胞的范围更广,对于Ad5感染效率相对低点神经胶质瘤细胞等具有很高的感染效率;2、感染效率更高,对各种造血细胞和肿瘤细胞的感染效率高于普通Ad5;3、外源基因表达量更多;4、包装系统更高效更稳定。 服务流程 A、腺病毒穿梭载体的构建:根据不同的研究需求构建腺病毒穿梭载体,如用于RNAi的腺病毒载体、用于基因过表达的腺病毒载体、用于启动子活性研究的腺病毒载体等;B、 腺病毒包装过程:将腺病毒穿梭质粒及其辅助包装质粒共转染至包装细胞中,通过Cre/loxP系统的作用实现重组,产生重组腺病毒颗粒。 提供产品
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