单抗制备服务

                          单抗McAb抗体制备服务

单克隆抗体（McAb）应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，通过HAT筛选，ELISA抗体检测，有限稀释克隆化，选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞，并产生抗体，就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上，包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面，均显示出巨大的生命力。 制备流程：  McAb的过程小鼠免疫：6-8周的健康雌性BALB/c 总1×108。骨髓瘤细胞的准备：  SP2/0 和NS-1 总  1×108 。饲养细胞的制备：KM 鼠的腹腔巨噬细胞1×105/ml 。采血：间接法ELISA检测血清的效价, 效价> 1:12000才合格。融合：选择性和培养   HAT。杂交瘤阳性克隆筛选：有限稀释法。初筛：选ELISA阳性孔高值的做有限稀释和细胞冻存。阳性率达到98%以上再做：亚型鉴定用酶联免疫法ELISA,和Western。大量制备McAb：体外培养（SFM）和体内诱生（腹水）。McAb：功能性鉴定1 ：杂交瘤细胞染色体的检查：秋水仙素裂解法。   （阳性率达到98%以上）2 ：亚型的测定：EILSA法。3 ：McAb的特异性鉴定：包括ELISA   免疫荧光  放免测定(RIA)4 ：McAb的效价测定：培养上清和腹水的稀释度表示>105方可。5 ：McAb的亲和力测定:免疫荧光,RIA ，ELISA法等。6 ：McAb的识别抗原的表位测定：Western，基因工程技术法等，识别McAb的抗原位点。  客户需提供的材料及信息: 客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质，纯度≥90%(SDS-PAGE检测)，若带融合标签需说明并提供筛选蛋白如为多肽，客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg，未偶联多肽1mg，偶联多肽纯度≥85% 结果提供： 实验报告                   免疫前血清（20μl）         免疫后血清（20μl） 抗体上清（至少3株,1ml/株）   杂交瘤细胞（3株）           抗体亚型 如需要纯化的客户增加如下结果： 纯化抗体（3株）(纯度≥90％,浓度≥1mg/ml,每株5mg）   免疫效价   抗体亲和力常数

单抗大量生产及纯化: 大规模的动物饲养平台，腹水生产及纯化平台，可供产生mg至g级的单克隆抗体。
 
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