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实验原理线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)是一种以JC-1 为荧光探针,快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒,可以用于早期的细胞凋亡检测。实验方法1、细胞重悬于0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。;2、用适当的方法诱导细胞凋亡,同时设立阴性依照组合阳性对照组,收集细胞;3、用PBS洗涤细胞三次,收集不多于1×106的细胞;4、加入0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20 分钟。5、在孵育期间,按照每1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。6、37℃孵育结束后,600g 4℃离心3~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。7、用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤2 次:加入1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g4℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。8、再用适量JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用流式细胞仪分析。
客户提供的资料1.实验细胞2.刺激药物实验流程细胞培养——加药刺激——流式上机检测——结果分析交付结果1.流式原始数据2.数据分析结果3.实验报告,包括仪器,试剂及实验步骤
客户需知公司仅提供南美血清及DMEM高糖、1640、DMEM/F12等常规培养基进行细胞培养,如需用到特殊培养基或者添加细胞因子,或者更高级别血清,需要客户自行提供。
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