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miRNA qRT-PCR表达检测概述:miRNA表达分析是生物功能研究的基础,同时是当今生物学研究的热点领域。准确检测细胞或实验动物组织中miRNA的表达可用来帮助研究者更快地研究miRNA的功能。 miRNA qRT-PCR原理:基于茎凸环结构引物的逆转录反应;实时荧光定量PCR。茎凸环结构的逆转录引物与miRNA 3'端部分结合,在逆转录酶作用下进行逆转录反应,特异的正向引物、通用反向引物及SYBR Green荧光染料进行定量扩增,实现逆转录产物实时定量检测。实验流程:1. 样品处理;2. 相分离;3. RNA沉淀;4. RNA洗涤、溶解、浓度测定、电泳检测;5. miRNA与特异性引物结合;6. RT反应;7. qPCR检测miRNA。 相关要求(客户提供):客户可根据网站提供的数据库,对靶基因进行预测,如需预测,客户需要提供miRNA相关信息。 最终结果:1. 具体试验流程(包括:实验步骤;主要仪器及试剂说明(含仪器厂家、型号、试剂厂家、批号);2. 原始实验图片及数据。
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