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简介当miRNAs与靶基因的3’ UTR结合后,主要抑制mRNA的翻译,可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平;也有部分表现为对标靶mRNA的降解,可以采用qRT-PCR进行检测。但无论那一种方法,都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测,蓝吉生物的技术人员利用Promega特有psiCHECK质粒,对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确判断。 服务优势:★ 采用Promega公司特有psiCHECK质粒;★ 所采用的Luciferase双萤光报告系统,可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度;★ 采用瞬时转染技术,操作简便、快速,周期短,适用于绝大多数细胞类型。 服务流程:★ PCR扩增靶基因的3’UTR,或直接合成结合位点序列(1-3次重复);★ 将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒;★ 合成miRNA 模拟物;★ 将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞;★ 多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。
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